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上海楚知生物科技有限公司是一家專注于生命科學實驗儀器、試劑和耗材的一站式服務公司。致力于為高校、科研院所和企業(yè)等系統(tǒng)客戶提供完整的解決方案和售后服務。公司產(chǎn)品高校及研究院用戶包括清華大學、北京大學、中科院系統(tǒng)、復旦大學、江南大學、華東理工大學、同濟大學、上海交通大學、中國農(nóng)業(yè)大學、第二軍醫(yī)大學、南京大學、中國藥科大學、廈門大學、等;企業(yè)用戶包括上海恒瑞醫(yī)藥、藥明康德、齊魯制藥、帝斯曼、吉林龍?zhí)┲扑?、浙江昌海藥業(yè)等一大批**企事業(yè)單位。提供的試劑有親和填料純化,抗體純化,磁珠,疏水,,生物酶,預制膠,預裝柱等一系列產(chǎn)品帶負電荷的強陰離子交換介質(zhì)。江蘇分子生物酶試劑代理廠家
上海楚知生物試劑分享篇:蛋白純化要利用不同蛋白間內(nèi)在的相似性與差異,利用各種蛋白間的相似性來除去非蛋白物質(zhì)的污染,而利用各蛋白質(zhì)的差異將目的蛋白從其他蛋白中純化出來。每種蛋白間的大小、形狀、電荷、疏水性、溶解度和生物學活性都會有差異,利用這些差異可將蛋白從混合物如大腸桿菌裂解物中提取出來得到重組蛋白。蛋白的純化大致分為粗分離階段和精細純化階段二個階段。一般蛋白純化采用的方法為樹脂法。粗分離階段主要將目的蛋白和其他細胞成分如DNA、RNA等分開,由于此時樣本體積大、成分雜,要求所用的樹脂高容量、高流速、顆粒大、粒徑分布寬.并可以迅速將蛋白與污染物分開,必要時可加入相應的保護劑(例如蛋白酶抑制劑),防止目的蛋白被降解。精細純化階段則需要更高的分辨率,此階段是要把目的蛋白與那些分子量大小及理化性質(zhì)接近的蛋白區(qū)分開來,要用更小的樹脂顆粒以提高分辨率,常用離子交換柱和疏水柱,應用時要綜合考慮樹脂的選擇性和柱效兩個因素。選擇性指樹脂與目的蛋白結(jié)合的特異性,柱效則是指各蛋白成分逐個從樹脂上集中洗脫的能力,洗脫峰越窄,柱效越好。*有好的選擇性,洗脫峰太寬,蛋白照樣不能有效分離。浙江天地人和試劑規(guī)格蛋白純化試劑哪個品牌好?
抗體純化磁珠 1.抗體純化磁珠試劑盒是否可以重復使用? 答:不推薦重復使用,不同樣本之間容易造成污染。 2.若體系中含有木瓜蛋白酶,是否影響磁珠的使用? 答:木瓜蛋白酶是一種蛋白水解酶,目前對protein A的影響未知,建議客戶慎用。 3.1mL抗體純化磁珠能夠用多少次? 答:1mL磁珠能夠結(jié)合1.5-2.0mg抗體,客戶需要根據(jù)結(jié)合抗體的量來確定使用磁珠的量。 4.試劑盒中的緩沖液用完后,能否告知配方? 答:試劑盒中緩沖液的成分都是保密的。可以采用以下的緩沖液進行替代。 結(jié)合緩沖液:PBST 150mM PBS,150mM NaCl,0.1% (v/v) Tween-20,pH7.2 洗脫緩沖液:甘氨酸緩沖液 0.1M Glycine,0.1% (v/v) Tween-20,pH2.5(該緩沖液適合于耐酸性的抗體)。 0.1M Glycine,3M MgCl2 (4M protein A/G) ,0.1% (v/v) Tween-20,pH4.5(該溶液含較高濃度的鹽,不可直接進行SDS-PAGE。可以用透析或超濾的方法去除過多的鹽)。 保存緩沖液: 50mM Tris-HCl,0.1%(v/v) Tween-20,0.01%(w/v) NaN3,pH7.5 洗滌緩沖液: 50mM Tris-HCl,0.1%(v/v) Tween-20,pH7.5) 再生緩沖液: 1% (v/v) TritonX-100
試劑篇:GST親和純化原理GST親和層析是利用GST融合蛋白與固定的谷胱甘肽(GSH)通過硫鍵共價親和,通過GSH交換洗脫的原理來進行純化。該純化柱中,凝膠手臂上通過硫鍵結(jié)合一個谷胱甘肽。然后利用谷胱甘肽與谷胱甘肽巰基轉(zhuǎn)移酶(即GST-tag(26KDa))之間酶和底物的特異性作用力,使得帶GST標簽的融合蛋白能夠與凝膠上的手臂谷胱甘肽結(jié)合,從而將帶標簽的蛋白與其他蛋白分離開。谷胱甘肽通常有氧化型GSSG和還原型GSH,當我們使用GSH洗脫時,GSH會與凝膠上的谷胱甘肽競爭結(jié)合融合蛋白,從而將目標蛋白洗脫。GST標簽蛋白可直接從細菌裂解液中利用含有還原型谷胱甘肽瓊脂糖凝膠(Glutathionesepharose)親和樹脂進行純化。GST標簽蛋白可在溫和、非變性條件下洗脫,因此保留了蛋白的抗原性和生物活性。GST在變性條件下會失去對谷胱甘肽樹脂的結(jié)合能力,因此不能在純化緩沖液中加入強變性劑如:鹽酸胍或尿素等。如果蛋白表達在包涵體中,可復性后再純化。此外要去除GST標簽,可用位點特異性蛋白酶切除。如何純化楚純度更高的樣品?
Ni NTA Beads是以4%瓊脂糖凝膠為基質(zhì),通過化學方法偶聯(lián)了四配位的氮川三乙酸(NTA),螯合鎳離子(Ni2+)后,可以形成非常穩(wěn)定的八面體結(jié)構(gòu),鎳離子處于八面體的中心,這樣的結(jié)構(gòu)很有效的保護了鎳離子免受小分子的進攻(產(chǎn)品結(jié)構(gòu)見圖1所示,三種產(chǎn)品結(jié)構(gòu)的區(qū)別),更加穩(wěn)定,具體性能見表1。Ni NTA Beads可以耐受一定濃度的還原劑、變性劑或耦合劑等苛刻條件(見表2),適用性更廣,配體更穩(wěn)定,選擇性更高。 選蛋白純化試劑iu選上海楚知-天地人和GFP,YFP,RFP標簽純化方案。福建抗體純化試劑哪里買
蛋白純化試劑哪家好?江蘇分子生物酶試劑代理廠家
蛋白純化試劑-ECL魯米諾化學發(fā)光試劑盒本產(chǎn)品是基于魯米諾底物的化學發(fā)光試劑盒,能夠被辣根過氧化物酶(HRP)催化發(fā)光。本試劑盒優(yōu)化了底物組成,使用了新型高效增強劑,發(fā)光強度比傳統(tǒng)ECL顯色液提高了30-100倍,并有效地降低了背景。試劑盒使用新的氧化劑代替不穩(wěn)定的雙氧水,提高了試劑盒的穩(wěn)定性,室溫可穩(wěn)定放置1年。工作液被HRP催化后,發(fā)出特定波長熒光(400-450nm),可對X光膠片曝光,也可直接使用熒光CCD掃描,主要應用于Western檢測以及化學發(fā)光免疫檢測系統(tǒng)江蘇分子生物酶試劑代理廠家
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