定量測(cè)定是醫(yī)學(xué)發(fā)展的重要保證。WHO1980年出版了男科實(shí)驗(yàn)室手冊(cè)***版及以后版本[1]?對(duì)有關(guān)男科的實(shí)驗(yàn)進(jìn)行了詳細(xì)的闡述。對(duì)計(jì)算機(jī)輔助精子分析進(jìn)行質(zhì)量管理包括:計(jì)算機(jī)本身的軟硬件、CASA分析結(jié)果、工作人員的具體操作幾方面。CASA參數(shù)包括精子數(shù)量和各種活動(dòng)力變量?其質(zhì)量包括所測(cè)得數(shù)據(jù)的可靠性、精確度、如何避免差錯(cuò)和數(shù)據(jù)的正確性及確認(rèn)?以及分析中的標(biāo)準(zhǔn)[2]。CASA質(zhì)量管理關(guān)系到男科實(shí)驗(yàn)室中**分析的質(zhì)量?具有以下特點(diǎn):⑴在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部質(zhì)量和醫(yī)生處置質(zhì)量方面?優(yōu)于其它測(cè)定精子運(yùn)動(dòng)的方法;⑵CASA結(jié)果及結(jié)果質(zhì)量的評(píng)估較困難;⑶WHO標(biāo)準(zhǔn)是醫(yī)生處置質(zhì)量保證的基礎(chǔ);⑷今后應(yīng)加強(qiáng)操作人員的培訓(xùn)。所有操作人員都應(yīng)接受規(guī)范的CASA分析儀使用培訓(xùn),嚴(yán)格按照使用指南進(jìn)行操作?。上海Hamilton Thorne精子分析W.H.O 4
CASA系統(tǒng)也可用于精子形態(tài)學(xué)評(píng)估。CASA系統(tǒng)可用來(lái)定量分析精子頭部形態(tài)學(xué)、中段甚至主段的形態(tài),可以把精子頭部和中段分類為正?;蛘卟徽?,還可以給出頭部和中段尺度、頭部橢圓率和勻稱性的均數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)差和中位數(shù),以及對(duì)染色的精子頂體區(qū)進(jìn)行測(cè)量[3]。與人工操作相比,自動(dòng)化系統(tǒng)更具客觀性,精確度和重復(fù)性的潛力[4]。精確度和重復(fù)性不低于7%[5],這優(yōu)于有經(jīng)驗(yàn)的技術(shù)人員的手工評(píng)估。兩個(gè)研究已經(jīng)提示在CASA結(jié)果與生育力之間存在***聯(lián)系。Coetzee等發(fā)現(xiàn)自動(dòng)分析的正常精子形態(tài)的結(jié)果是預(yù)示體外受精率和妊娠率的有意義指標(biāo)[6]。Garrett等發(fā)現(xiàn)**中能與透明帶結(jié)合的、具有某些頭部形態(tài)特征的精子所占的百分比(Z%),和直線速度(VSL)的精子的百分比,與大樣本的低生育力夫婦的自然妊娠率是有***且**的關(guān)系。Z%和VSL與生育力間的關(guān)系顯示是連續(xù)的,而且沒有顯示臨界值;高于臨界值,妊娠率也不會(huì)進(jìn)一步增加[7]。上海CASA精子分析DCL該設(shè)備的設(shè)計(jì)緊湊,占用空間小,適合不同規(guī)模的實(shí)驗(yàn)室使用。
精液顯微鏡檢查精子計(jì)數(shù):正常人精子計(jì)數(shù)為0.6×1012~1.5×0.012/L,相當(dāng)于一次排出的精子總數(shù)為400×106~600×106。當(dāng)精子計(jì)數(shù)值<20×106/ml或一次排精總數(shù)<100×106為精子減少,超過(guò)致孕極限而導(dǎo)致不育。精液直接涂片或離心沉淀后均未查到精子為無(wú)精癥。見于先天性睪丸發(fā)育不全、畸形或后天睪丸損傷和萎縮(如睪丸結(jié)核、炎癥、淋病、垂體或腎上腺功能異常的內(nèi)分泌性疾病等)、輸精管阻塞或是先天性輸精管及精囊缺陷,是導(dǎo)致少精或無(wú)精的重要原因,也是導(dǎo)致不育的重要原因。檢查有無(wú)精子也是檢查輸精管結(jié)扎術(shù)的效果觀察。結(jié)扎六周后,連續(xù)檢查無(wú)精子,說(shuō)明手術(shù)成功,如果結(jié)扎兩個(gè)月后,精液中仍有精子,說(shuō)明手術(shù)不成功。
前沿性檢查:目前不作為生育力低下男性初步評(píng)估的常規(guī)方法。這一部分包括了非常專業(yè)化的、主要用于研究的方法和其他新興檢測(cè)技術(shù)。有研究認(rèn)為,氧化應(yīng)激可能是影響人類精子功能和妊娠結(jié)局的重要因素;新的證據(jù)也表明了精子DNA完整性和染色質(zhì)組裝與生育力的關(guān)系。前沿性檢查一節(jié)中詳細(xì)介紹了精子氧化應(yīng)激和活性氧實(shí)驗(yàn)、精子染色質(zhì)檢測(cè)(苯胺藍(lán)和色霉素A3染色)的具體實(shí)驗(yàn)操作及討論。手冊(cè)重寫了計(jì)算機(jī)輔助精子分析(CASA)部分,強(qiáng)調(diào)了CASA對(duì)于檢測(cè)精子濃度的局限性與質(zhì)控要求,增加了CASA檢測(cè)精子超活化運(yùn)動(dòng)的內(nèi)容。對(duì)精子跨膜離子流和轉(zhuǎn)運(yùn)的功能分析,可更好地了解男性不育因素和男性生殖***疾病。為此,手冊(cè)新增了檢測(cè)精子跨膜離子流和轉(zhuǎn)運(yùn)的內(nèi)容。CASA系統(tǒng)可以給出多種精子運(yùn)動(dòng)狀態(tài)的參數(shù),這些參數(shù)能夠幫助更有效地了解精子的運(yùn)動(dòng)特性。
男科實(shí)驗(yàn)室中通常所指的質(zhì)量包含三個(gè)方面:實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部質(zhì)量、醫(yī)生處置的質(zhì)量以及結(jié)果的質(zhì)量[3]。1.實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部質(zhì)量與**分析有關(guān)的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部質(zhì)量主要是工作人員的素質(zhì)和所采用儀器的質(zhì)量。工作人員應(yīng)經(jīng)過(guò)特殊的培訓(xùn)?儀器必須處于正常狀態(tài)、確保準(zhǔn)確的結(jié)果?操作應(yīng)符合規(guī)程[4]。CASA系統(tǒng)本身的質(zhì)量難于評(píng)定。硬件?如顯微鏡、影像攝影機(jī)和計(jì)算機(jī)經(jīng)檢查便可確定其可靠性。但軟件并非如此?軟件中存在不確定的因素?算法是軟件中**重要的部分?通常制造者保守這些秘密;因此?有關(guān)軟件的數(shù)學(xué)上、信息性的、統(tǒng)計(jì)學(xué)的或生物測(cè)量方面的檢查實(shí)驗(yàn)室難于進(jìn)行。精子分析儀參數(shù),平均路徑速率(VAP)?:精子頭沿其平均路徑移動(dòng)時(shí)的時(shí)均速率。香港水生動(dòng)物精子分析DSL
通過(guò)計(jì)算機(jī)圖像處理功能對(duì)顯微鏡下放大的精子圖像進(jìn)行識(shí)別和跟蹤計(jì)算,從而得出精子動(dòng)靜態(tài)各項(xiàng)參數(shù)。上海Hamilton Thorne精子分析W.H.O 4
精子分析儀是計(jì)算機(jī)技術(shù)和圖像處理技術(shù)結(jié)合的**分析儀器設(shè)備,通過(guò)顯微鏡下攝像和計(jì)算機(jī)快速分析多個(gè)視野內(nèi)精子的運(yùn)行軌跡,客觀記錄了精子的密度、活動(dòng)力、活動(dòng)率和存活率等各項(xiàng)參數(shù)。計(jì)算機(jī)輔助**分析儀由硬件系統(tǒng)和軟件系統(tǒng)組成。硬件系統(tǒng)主要由顯微攝像系統(tǒng)、圖像采集系統(tǒng)、恒溫系統(tǒng)、計(jì)算機(jī)處理系統(tǒng)等四大系統(tǒng)構(gòu)成。此外,儀器一般配有**樣品盒,以確保單層取樣[1]。1.顯微攝像系統(tǒng):由顯微鏡及CCD組成??梢詫?biāo)本信號(hào)通過(guò)顯微放大由CCD傳輸?shù)接?jì)算機(jī)2.圖像采集系統(tǒng):由圖像卡構(gòu)成,其功能是對(duì)CCD信號(hào)進(jìn)行抓拍、識(shí)別、預(yù)處理后,將成熟信號(hào)輸送到計(jì)算機(jī)。3.恒溫系統(tǒng):由加溫和保溫設(shè)備組成。加溫是通過(guò)熱吹風(fēng)機(jī)不斷將適宜的溫度熱風(fēng)鼓入封閉保溫罩內(nèi),提供穩(wěn)定、可靠的檢查環(huán)境。4.計(jì)算機(jī)系統(tǒng):對(duì)圖像信號(hào)進(jìn)行***系統(tǒng)的加工處理,對(duì)獲得的數(shù)據(jù)進(jìn)行輸出和存儲(chǔ)的設(shè)備。軟件系統(tǒng)采用**的精子質(zhì)量分析軟件,利用現(xiàn)代化的計(jì)算機(jī)識(shí)別技術(shù)和圖像處理技術(shù),對(duì)精子的動(dòng)靜態(tài)特征進(jìn)行***的量化分析,對(duì)精子的密度、活力、活率、運(yùn)動(dòng)軌跡等特征進(jìn)行量的檢測(cè)分析上海Hamilton Thorne精子分析W.H.O 4