溴甲酚紫葡萄糖肉湯:微生物檢測的高效工具溴甲酚紫葡萄糖肉湯(Bromocresol Purple Dextrose Broth,簡稱BGBM)是一種廣應(yīng)用于微生物學(xué)領(lǐng)域的培養(yǎng)基,特別適用于低酸性罐頭食品的商業(yè)無菌檢驗(yàn)。其獨(dú)特的成分和性質(zhì)使其成為細(xì)菌和菌的理想生長環(huán)境。制備方法:稱取28.0g培養(yǎng)基干粉,加入1000ml蒸餾水或去離子水中。加熱攪拌至完全溶解。分裝于帶有小倒管的試管中,每管10ml。121℃高壓滅菌15分鐘,備用。檢驗(yàn)原理蛋白胨和牛肉浸粉提供碳氮源、維生素和生長因子;葡萄糖為可發(fā)酵的糖類;氯化鈉維持均衡的滲透壓;溴甲酚紫作為pH指示劑,通過顏色變化反映培養(yǎng)基中pH的變化。應(yīng)用溴甲酚紫葡萄糖肉湯主要用于:培養(yǎng)細(xì)菌和鑒別細(xì)菌發(fā)酵葡萄糖試驗(yàn)。低酸性罐頭食品的商業(yè)無菌檢驗(yàn)(GB/T 4789.26-2003)。質(zhì)量控制質(zhì)控菌株接種后于36±1℃培養(yǎng)96-120小時(shí),結(jié)果如下:大腸埃希氏菌(ATCC 25922):產(chǎn)酸產(chǎn)氣。銅綠假單胞菌(ATCC 9027):不產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。短小芽孢桿菌(ATCC 27124):產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。注意事項(xiàng)稱量時(shí)注意粉塵,佩戴口罩操作以避免引起呼吸道系統(tǒng)不適。干粉培養(yǎng)基使用后立即旋緊瓶蓋,避免吸潮結(jié)塊。貯存于避光、干燥處,未開封產(chǎn)品保質(zhì)期三年。菌顯色培養(yǎng)基含有特定的顯色底物,當(dāng)菌在培養(yǎng)基上生長時(shí),其代謝產(chǎn)物會(huì)與顯色底物發(fā)生反應(yīng)。改良DG-18瓊脂培養(yǎng)皿
霉菌和酵母菌顯色培養(yǎng)基:微生物檢測的“顯色”利器霉菌和酵母菌顯色培養(yǎng)基是一種基于酶底物法的微生物檢測工具,通過顯色反應(yīng)來區(qū)分和鑒定霉菌與酵母菌。這種培養(yǎng)基利用微生物自身代謝產(chǎn)生的特異性酶與顯色底物反應(yīng),使菌落呈現(xiàn)特定顏色。制備時(shí),按4.75g/100ml的比例稱取培養(yǎng)基粉末,加入蒸餾水或純化水中,加熱煮沸至完全溶解,冷卻至45-50℃后傾注平皿,冷卻凝固備用。操作步驟按標(biāo)準(zhǔn)方法制備樣品液。取適量樣品液涂布或劃線接種于平板上。在25-28℃培養(yǎng)3-5天。觀察菌落顏色:白色念珠菌、熱帶菌、光滑菌、克柔假絲酵母菌、釀酒酵母菌均顯藍(lán)綠色;霉菌顯棉狀藍(lán)綠色菌落;細(xì)菌生長受抑制。優(yōu)點(diǎn)與應(yīng)用快速檢測:3-5天即可觀察結(jié)果。高特異性:通過顯色反應(yīng),能有效區(qū)分霉菌和酵母菌。操作簡便:無需復(fù)雜設(shè)備。這種培養(yǎng)基廣泛應(yīng)用于食品、環(huán)境樣品中霉菌和酵母菌的檢測,為微生物檢測提供了一種高效、準(zhǔn)確的方法。Baird-Parker瓊脂培養(yǎng)皿微生物競賽中,選手用接種針在培養(yǎng)皿上劃出復(fù)雜的幾何圖案,培養(yǎng)后形成彩色菌苔。
沙門氏菌顯色培養(yǎng)基是一種用于快速篩選和分離沙門氏菌的微生物培養(yǎng)基。其關(guān)鍵原理是利用沙門氏菌特有的酶與顯色基團(tuán)發(fā)生特異性反應(yīng),使色原游離出來,從而使沙門氏菌在培養(yǎng)基上呈現(xiàn)出特定的顏色。這種顯色特性使得沙門氏菌能夠與其他腸道桿菌(如大腸桿菌)區(qū)分開來,后者通常呈現(xiàn)不同的顏色。例如,沙門氏菌在某些顯色培養(yǎng)基上可能呈現(xiàn)紫色或藍(lán)色,而大腸桿菌則可能呈現(xiàn)粉紅色或無色。應(yīng)用場景沙門氏菌顯色培養(yǎng)基廣泛應(yīng)用于食品、飼料和環(huán)境樣品中沙門氏菌的檢測。它不僅能夠快速篩選出沙門氏菌,還能有效減少背景菌群的干擾。這種培養(yǎng)基的使用,更大提高了檢測效率,縮短了檢測時(shí)間,相比傳統(tǒng)的檢測方法,能夠更快地獲得結(jié)果。操作流程使用沙門氏菌顯色培養(yǎng)基時(shí),首先需要對(duì)樣品進(jìn)行富集培養(yǎng),通常使用緩沖蛋白胨水(BPW)或其他適合的富集肉湯。富集后的樣品經(jīng)過適當(dāng)處理后,涂布在顯色培養(yǎng)基上,然后在適宜的溫度下培養(yǎng)。經(jīng)過一段時(shí)間后,根據(jù)菌落的顏色進(jìn)行初步判斷,再通過生化或血清學(xué)方法進(jìn)行確認(rèn)。優(yōu)勢沙門氏菌顯色培養(yǎng)基的主要優(yōu)勢在于其快速、準(zhǔn)確和操作簡便。它能夠顯著提高檢測效率,減少誤判的可能性。
在微生物培養(yǎng)過程中,雜菌污染是一個(gè)常見的問題,它會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。改良CCD瓊脂基礎(chǔ)通過優(yōu)化配方,增強(qiáng)了其抗物質(zhì)性能,能夠有效抑制雜菌的生長。這種改良使得培養(yǎng)基在支持目標(biāo)微生物生長的同時(shí),減少了雜菌的干擾。改良后的培養(yǎng)基在成分上進(jìn)行了調(diào)整,通過添加特定的抗物質(zhì)成分或調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的物理化學(xué)性質(zhì),提高了其對(duì)雜菌的抑制能力。例如,改良CCD瓊脂基礎(chǔ)可以通過調(diào)節(jié)pH值或添加抗菌劑,抑制雜菌的生長,從而為純培養(yǎng)提供良好的環(huán)境。這種抗物質(zhì)性能的提升,不僅提高了培養(yǎng)的純度,還減少了因雜菌污染導(dǎo)致的實(shí)驗(yàn)失敗,為微生物學(xué)研究和工業(yè)生產(chǎn)提供了有力的支持。
營養(yǎng)肉湯(NB):基礎(chǔ)而重要的細(xì)菌培養(yǎng)基營養(yǎng)肉湯(Nutrient Broth,簡稱NB)是一種廣使用的細(xì)菌培養(yǎng)基,適用于一般細(xì)菌的培養(yǎng)、傳代、轉(zhuǎn)種、復(fù)壯和增菌。其主要成分包括蛋白胨、牛肉浸粉(或牛肉膏粉)和氯化鈉。其中,蛋白胨和牛肉浸粉為微生物生長提供氮源、B族維生素、氨基酸和其他生長因子,同時(shí)也提供碳源;氯化鈉則用于維持培養(yǎng)基的滲透壓。制備方法營養(yǎng)肉湯的典型配方為:蛋白胨10.0g、牛肉浸粉3.0g、氯化鈉5.0g,加蒸餾水至1000ml。制備時(shí),將上述成分加熱攪拌溶解于蒸餾水中,調(diào)節(jié)pH至7.2±0.2,分裝至三角瓶或試管中,121℃高壓滅菌15分鐘。滅菌后的營養(yǎng)肉湯應(yīng)為淡黃色透明無沉淀的溶液,pH值應(yīng)為7.2-7.4。應(yīng)用領(lǐng)域營養(yǎng)肉湯適合營養(yǎng)需求較高的細(xì)菌的生長,但不適用于苛養(yǎng)型微生物。它廣用于食品、牛奶、奶制品的微生物檢測,以及其他需要一般細(xì)菌培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)中。此外,營養(yǎng)肉湯還可作為一些特殊培養(yǎng)基的基本成分,在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中添加所需營養(yǎng)物質(zhì),以滿足特定微生物的生長需求。注意事項(xiàng)在制備過程中,應(yīng)穿戴實(shí)驗(yàn)服、護(hù)目鏡、手套等防護(hù)設(shè)備,以防止培養(yǎng)基飛濺到皮膚或眼睛中。確保實(shí)驗(yàn)環(huán)境清潔,以減少微生物污染的可能性。其關(guān)鍵原理是通過特定的顯色劑和培養(yǎng)基成分,使腸球菌在培養(yǎng)基上形成具有特征顏色的菌落,而實(shí)現(xiàn)快速鑒定。假單胞菌瓊脂F(xiàn)平板
李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基憑借其快速、準(zhǔn)確、操作簡便的特點(diǎn),已成為檢測單增李斯特氏菌的重要工具。改良DG-18瓊脂培養(yǎng)皿
操作步驟按國家標(biāo)準(zhǔn)或其他方法制備樣品液。取1毫升樣品液加入9毫升SCPB肉湯或堿性蛋白胨水中,36±1℃增菌培養(yǎng)18-24小時(shí)。用3毫米接種環(huán)取1環(huán)增菌液,劃線接種到弧菌顯色培養(yǎng)基上,做2個(gè)平板。36±1℃培養(yǎng)18-24小時(shí),觀察菌落顏色。應(yīng)用弧菌顯色培養(yǎng)基廣泛應(yīng)用于食品、海產(chǎn)品、病人糞便樣品和水產(chǎn)品中弧菌的檢測。它能夠快速區(qū)分不同種類的弧菌,提高檢測效率,減少誤判。這種培養(yǎng)基的特異性高,可以克服傳統(tǒng)TCBS培養(yǎng)基引起的假陰性結(jié)果??傊?,弧菌顯色培養(yǎng)基憑借其快速、準(zhǔn)確、特異性高的特點(diǎn),已成為檢測弧菌的重要工具,廣泛應(yīng)用于食品安全、疾病預(yù)防和環(huán)境監(jiān)測等領(lǐng)域。改良DG-18瓊脂培養(yǎng)皿