乙?；揎椀鞍捉M學(xué)應(yīng)用方向有什么？1、基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)、臨床診斷：生物標(biāo)志物，疾病機理機制，疾病分型，個性化治理等；2、生物醫(yī)藥：藥物作用機理，藥效評價，藥物開發(fā)等；3、微生物領(lǐng)域：致病機理，耐藥機制，病原體-宿主相互作用研究等；4、海洋水產(chǎn)：漁業(yè)資源，海水養(yǎng)殖，漁業(yè)環(huán)境與水產(chǎn)品安全等；5、生物能源、環(huán)境科學(xué)領(lǐng)域：發(fā)酵過程優(yōu)化，生物燃料生產(chǎn)，環(huán)境危定風(fēng)險評估研究等；6、食品營養(yǎng)：食品儲藏及加工條件優(yōu)化，食品組分及品質(zhì)鑒定，功能性食品開發(fā)，食品安全監(jiān)檢測等。蛋白質(zhì)翻譯后修飾（PTMs）是指蛋白質(zhì)在翻譯中或翻譯后的化學(xué)修飾過程。南京琥珀?；揎椀鞍踪|(zhì)組學(xué)價格

蛋白質(zhì)糖基化修飾組學(xué)技術(shù)怎么確定位點？蛋白質(zhì)經(jīng)過酶解后利用凝集素（lectin）富集N-糖基化肽段，然后用N-糖酰胺酶（PNGase）在H218O中切除連接在天冬酰胺殘基（Asn）上的糖鏈。該處理致使Asn分子量增加2.9890Da。之后用高精度LC-MS質(zhì)譜儀檢測脫糖后的肽段，并通過MASCOT軟件檢索數(shù)據(jù)庫，確認(rèn)脫糖后分子量與其理論分子量的變化以及糖基化修飾肽段的序列，從而確定該蛋白質(zhì)的N-糖基化位點。琥珀?；揎椀鞍踪|(zhì)組技術(shù)特點：采用主流抗體親和富集方法，特異性高，富集效率好。濟南亞硝基化修飾蛋白質(zhì)組學(xué)類型乙?；揎検求w內(nèi)保守的可逆轉(zhuǎn)的蛋白修飾。

乙?；揎椀鞍捉M學(xué)實驗流程：1）組織/細(xì)胞破碎，提取蛋白質(zhì)；2）蛋白酶解成多肽片段；3）對多肽片段進行 iTRAQ 標(biāo)記；4）高效特異性乙?；贵w富集乙?；揎楇亩?；5）使用 LC-MS/MS 對富集的乙?；亩芜M行序列分析；5）數(shù)據(jù)分析，比對不同樣本中蛋白乙?；揎椝讲町悾Ξa(chǎn)生變化的生物學(xué)意義進行解釋。乙?；且粋€普遍而重要的蛋白質(zhì)翻譯后修飾，不僅集中在對細(xì)胞染色體結(jié)構(gòu)的影響以及對核內(nèi)轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子方面，而且還影響參與細(xì)胞周期和新陳代謝、肌動蛋白聚合控制及多聚谷氨酰胺疾病等方方面面。乙?；粌H存在于真核細(xì)胞中，而且越來越多的證據(jù)也表明乙?；瑯佑绊懺S多原核細(xì)胞的生理生化過程。

蛋白質(zhì)翻譯后修飾的重要性：翻譯后修飾可以發(fā)生在蛋白質(zhì)生命周期的任何階段。例如，許多蛋白質(zhì)在翻譯完成后不久就被修飾，以介導(dǎo)適當(dāng)?shù)牡鞍踪|(zhì)折疊或穩(wěn)定，或?qū)⑿律鞍踪|(zhì)引導(dǎo)到不同的細(xì)胞區(qū)室（例如，細(xì)胞核、膜）。折疊和定位完成后發(fā)生其他修飾，以刺激或滅活催化活性或以其他方式影響蛋白質(zhì)的生物活性。蛋白質(zhì)也與靶向降解蛋白質(zhì)的標(biāo)簽共價連接。除了單一的修飾外，蛋白質(zhì)通常還通過翻譯后切割和通過蛋白質(zhì)成熟的分步機制增加功能基團的組合進行修飾。分析蛋白質(zhì)及其翻譯后修飾對于心臟病、神經(jīng)退行性疾病和糖尿病的研究尤為重要。PTMs 的特征，雖然具有挑戰(zhàn)性，但提供了對病因?qū)W過程下的細(xì)胞功能的無價的洞察。在技術(shù)上，研究翻譯后修飾蛋白的主要挑戰(zhàn)是開發(fā)特異性的檢測和純化方法。幸運的是，這些技術(shù)障礙正在用各種新的和精煉的蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)來克服。在蛋白翻譯后修飾方式的鑒定過程中，蛋白會首先被酶切成肽段，然后進入質(zhì)譜進行分析。

蛋白質(zhì)翻譯后修飾自中而下分析策略：自中而下的蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)可用于組蛋白修飾的分析。樣品制備與普遍使用的自下而上的分析策略相同，直到得到純化的組蛋白。提取組蛋白后，用GluC進行消化。然后用弱陽離子交換/親水相互作用色譜（WCX-HILIC）與配備電子轉(zhuǎn)移解離（ETD）的高分辨率質(zhì)譜聯(lián)機聯(lián)用，對樣品進行理想的分離。譜識別可以用傳統(tǒng)的軟件進行，但是由于估計適當(dāng)?shù)腻e誤發(fā)現(xiàn)率的問題，需要對結(jié)果進行過濾。自上而下分析策略：自上而下的技術(shù)可以直接引入完整的蛋白質(zhì)并在串聯(lián)質(zhì)譜儀上對其進行片段化，不需要蛋白質(zhì)水解消化。目前，有兩種完全分離蛋白質(zhì)的方法：離線和在線。前者用四維分離法，后者用WCX-HILIC。蛋白質(zhì)磷酸化修飾可應(yīng)用于食品工業(yè)方面。河南蛋白質(zhì)磷酸化修飾組學(xué)

通過蛋白質(zhì)翻譯后修飾也進一步增加了細(xì)胞通路機制和生命活動的多樣性和復(fù)雜性。南京琥珀酰化修飾蛋白質(zhì)組學(xué)價格

泛素化修飾蛋白組學(xué)研究：泛素化修飾蛋白組學(xué)是一種重要的翻譯后修飾。泛素-蛋白酶體系統(tǒng)介導(dǎo)了真核生物體內(nèi)80%~85%的蛋白質(zhì)降解。此外，泛素化修飾還可以直接影響蛋白質(zhì)的活性和定位，調(diào)控包括細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡、轉(zhuǎn)錄調(diào)控、DNA 損傷修復(fù)以及免疫應(yīng)答等在內(nèi)的多種細(xì)胞活動。由于翻譯后修飾的蛋白質(zhì)在生物樣本中含量低、動態(tài)范圍廣，質(zhì)譜分析前需要對修飾進行富集以提高其豐度，然后利用傳統(tǒng)的定量蛋白組分析手段對富集得到的泛素化肽段樣品進行定量分析。南京琥珀?；揎椀鞍踪|(zhì)組學(xué)價格