LC-MS非靶向代謝組學:LC-MS非靶向代謝組學通過液質聯(lián)用(LC-MS)方法檢測生物體受外界刺激前后體內大多數(shù)小分子代謝物的動態(tài)變化,重點尋找在實驗組和對照組中有明顯變化的代謝物,進而研究這些代謝物與生理病理變化的相關關系,其研究對象大都是分子量1500Da以內的小分子物質。LC-MS非靶向代謝組學技術優(yōu)勢:1、較高的靈敏度、分辨率;2、較寬的動態(tài)范圍;3、適合于生物樣本中復雜代謝產物的檢測和潛在標志物的鑒定;4、適合對標本中未知代謝物的探索研究。代謝組學技術可應用于藥物毒理學。哈爾濱個性化定制靶向代謝組學領域
代謝組學究竟是一門什么樣的研究方向?首先定義什么是代謝組學。簡單的說就是研究生物體對內外刺激的整體代謝應答規(guī)律。那么為什么代謝組學是基因組,轉錄組,蛋白質組的下游。我們研究它到底有什么意義。中心法則告訴我們了遺傳信息的流向,的執(zhí)行者蛋白質中很多酶參與了體內的代謝過程?;驕y序數(shù)量太大,而且基因水平解釋問題往往很吃力。因為基因的調控和生物學事件之間隔了一個很漫長的信號轉導過程。蛋白同理,一是蛋白種類巨大,二是蛋白組學發(fā)展進入瓶頸;發(fā)展代謝組是因為代謝物種類只有不到1w種,建立它的差異分析更加簡單,同時在價格等方面更有推廣的意義。湖北非靶向代謝組學檢測價格LC-MS非靶向代謝組的優(yōu)勢有什么?
什么是代謝組學?代謝組學是用來解決什么問題的?代謝組學(Metabonomics/Metabolomics)是發(fā)展起來的一門新興學科,是研究關于生物體被擾動后(如基因的改變或環(huán)境變化后)其代謝產物(內源性代謝物質)種類、數(shù)量及其變化規(guī)律的科學。代謝組學著重研究的是生物整體、組織的內源性代謝物質的代謝途徑及其所受內在或者外在因素的影響及隨時間變化的規(guī)律。代謝組學通過揭示內在和外在因素影響下代謝整體的變化軌跡來反映某種病理生理過程中所發(fā)生的一系列生物事件。
代謝組學細胞樣本收集:懸浮細胞:1)連同培養(yǎng)基轉移到1.5 mL的進口離心管中。2)低速離心5 min(低于3000 rpm),使細胞沉淀于離心管的底部(1*107個細胞為宜)。3)倒掉培養(yǎng)基(盡量倒干凈),用預冷的PBS反復沖洗2 ~ 3次,低速離心5 min,棄上清。4)標記離心管,將離心管的尖的一端插入液氮中,淬滅細胞沉淀1 min,-80 ℃凍存,干冰寄送。注意事項:1. 培養(yǎng)基傾倒時盡量倒干凈,可使用濾紙將殘留培養(yǎng)液吸凈;2. 甲醇/水請使用色譜純及以上規(guī)格;3. 液氮淬滅細胞時,請小心避免離心管破碎導致樣本受損;4. 建議細胞樣本在進行培養(yǎng)時多準備樣本,以備后續(xù)使用。代謝組學作為系統(tǒng)生物學的重要組成部分,在臨床醫(yī)學領域具有普遍的應用前景。
代謝組學研究方法: 對于代謝產物來說,不只只有質譜峰這個特征。更進一步說,質譜(MS)并不能檢測出所有的代謝產物,并不是因為質譜的靈敏度不夠,而是由于質譜只能檢測離子化的物質,但有些代謝產物在質譜儀中不能被離子化。采用核磁共振(NMR)的方法,可以彌補色譜的不足。過去,只有毒理學方面的研究使用核磁共振,而質譜只在植物代謝研究中采用。如今,這兩種方法在代謝組學研究中已經普遍使用。為在不同樣品間進行有意義的比較,研究人員必須結合使用這兩種方法獲得的大量數(shù)據進行分析。此外,還需要結合基因組學研究獲得的數(shù)據。代謝組學的研究方法與蛋白質組學的方法類似。哈爾濱個性化定制靶向代謝組學領域
代謝組學主要技術手段是核磁共振,質譜,色譜,其中以NMR為主。哈爾濱個性化定制靶向代謝組學領域
代謝組學有哪些特點?(1) 代謝處于系統(tǒng)生物學的末端,更能反映基因與外部環(huán)境互作的真實情況,因此,在多數(shù)生物表型研究上更加適用。(2) 常規(guī)代謝組學只關注內源性化合物,也有使用代謝組學技術測定外源性化合物的。內源性化合物的上調和下調指示了與疾病、毒性、基因修飾或環(huán)境因子的影響。(3) 高通量定量和定性研究生物小分子化合物。(4) 內源性化合物的結果可以作為疾病的診斷、藥物篩選或者其他分型評估等潛在生物標志物。謝組學通過揭示內在和外在因素影響下,生物體的代謝整體的變化軌跡來反映某種生理或病理的一系列發(fā)展過程。哈爾濱個性化定制靶向代謝組學領域