18g)2210R8042-03SQDNARNAproteinKit(36g)4528R8042-04SQDNARNAproteinKit(72g)8694mRNA純化試劑盒:用Oligo(dt)纖維素從總RNA或組織中純化PolyAmRNAR6511-01mRNAEnrichmentKit(10preps)1580R6511-02mRNAEnrichmentKit(30preps)4560磁珠MRNA提取試劑盒:R6570-01Mag-BindmRNAKit(10)1485R6570-02Mag-BindmRNAKit(30)3780磁珠MRNA提取試劑盒:不帶總RNA提取試劑R65...
操作過程要小心,帶口罩、手套避免環(huán)境中RNA酶污染樣品。RNA在水溶液中OD值可能在,但這并不表示RNA不純,需電泳檢測。使用時一定要根據(jù)自己的實驗需要購買特定使用提取試劑盒,如果不是特定使用試劑盒,或許能提出RNA,但不能確保其質(zhì)量以及完整性,會影響RT-PCR、Northernblot、Dotblot、RealtimeRTPCR、芯片分析、polyA篩選、體外翻譯、RNase保護分析、分子克隆等后續(xù)實驗的結(jié)果。當前提取效果好的是RNA提取試劑盒,但其售價較高,單次實驗費用花費太大,對精度要求不高的實驗沒有必要購買,當然還有其它的進口試劑盒,但是均存在價格高、訂貨周期長的問題(如果碰...
與DNA相比,RNA種類繁多,分子量較小,含量變化大。RNA可根據(jù)結(jié)構(gòu)和功能的不同分為信使RNA和非編碼RNA。非編碼RNA分為非編碼大RNA和非編碼小RNA。非編碼大RNA包括核糖體RNA、長鏈非編碼RNA。非編碼小RNA包括轉(zhuǎn)移RNA、核酶、小分子RNA等。小分子RNA(20~300nt)包括miRNA、SiRNA、piRNA、scRNA、snRNA、snoRNA等,細菌也有小分子RNA(50~500nt)。[2]不同類型的RNA的功能和分布名稱功能存在信使RNA(mRNA)翻譯模板。所有的生物轉(zhuǎn)移RNA(tRNA)攜帶氨基酸,參與翻譯。所有的生物核糖體RNA(rRNA)核糖體...
5x96)超薄柱型PCR產(chǎn)物純化試劑盒:用低洗脫體積純化或濃縮PCR產(chǎn)物、酶切產(chǎn)物D6293-01MicroEluteCyclePureKit(50)D6293-02MicroEluteCyclePureKit(200)超薄柱型瓊脂糖凝膠回收試劑盒:用低洗膠體積純化濃縮瓊脂糖凝膠中的DNAD6294-01MicroEluteGelExtracionKit(50)D6294-02MicroEluteGelExtracionKit(200)DNA探針純化試劑盒:從標記反應中快速回收DNA探針D6538-00DNAProbePurificationKit(5)D6538-01DNAProbe...
[2](5)核酶所催化的反應都是不可逆的。[2](6)核酶催化反應時需要Mg2+,Mg3+既維持核酶的活性構(gòu)象,又參與催化反應。[2](7)多數(shù)核酶在細胞內(nèi)含量極低。[2]3.核酶意義①核酶的發(fā)現(xiàn)和研究使我們對RNA的生理功能有了進一步的認識,即它既是遺傳信息的載體,又是生物催化劑,兼有DNA和蛋白質(zhì)兩類生物大分子的功能。[2]②核酶的發(fā)現(xiàn)動搖了所有生物催化劑都是蛋白質(zhì)的傳統(tǒng)觀念。[2]③核酶的發(fā)現(xiàn)對于了解生命進化過程具有重要意義,RNA或許是更早出現(xiàn)的生物大分子。[2]4.核酶應用①基因***;②特定RNA降解;③生物傳感器;④功能基因組學;⑤基因發(fā)現(xiàn)。[2]細胞中的分布編輯播報...
②上層容量約為所加TotalRNAExtractionReagent總量的50-60%。如加入1mLTotalRNAExtractionReagent,上層水相約為500-600μL。建議吸取400-500μL,以防吸到中間層造成DNA污染。③有機相和中間層是蛋白和DNA,可用于后續(xù)抽提。3)小心吸取上層水相至新離心管中,加入1/2體積異丙醇(如每1mLTotalRNAExtractionReagent加入mL異丙醇)。顛倒混勻后室溫放置10min。4)4℃,12000g離心10min。【注】:RNA沉淀在離心前通常不可見,離心后在管側(cè)和管底形成膠狀沉淀。5)小心棄去上清,加入等體積7...
不過,這些核糖體的基本結(jié)構(gòu)和功能一致。[2]核酶科學家在研究RNA的轉(zhuǎn)錄后加工時發(fā)現(xiàn)某些RNA有催化活性,可以催化RNA的剪接,這些由活細胞合成、起催化作用的RNA稱為核酶。許多核酶的底物也是RNA,甚至就是其自身,其催化反應也具有專一性。[2]已經(jīng)闡明的天然核酶有錘頭狀核酶、發(fā)夾狀核酶、I型內(nèi)含子、Ⅱ型內(nèi)含子、丁型肝炎病毒核酶、核糖核酸酶P、肽基轉(zhuǎn)移酶等。如何評價核酶的理論意義與實際意義,如何看待核酶與傳統(tǒng)意義上的酶在代謝中的地位,都有待進一步研究。[2]1.核酶發(fā)現(xiàn)核酶更早由Cech和Altman(1989年諾貝爾化學獎獲得者)發(fā)現(xiàn)。1967年,Woese、Crick與Orge...
②上層容量約為所加TotalRNAExtractionReagent總量的50-60%。如加入1mLTotalRNAExtractionReagent,上層水相約為500-600μL。建議吸取400-500μL,以防吸到中間層造成DNA污染。③有機相和中間層是蛋白和DNA,可用于后續(xù)抽提。3)小心吸取上層水相至新離心管中,加入1/2體積異丙醇(如每1mLTotalRNAExtractionReagent加入mL異丙醇)。顛倒混勻后室溫放置10min。4)4℃,12000g離心10min?!咀ⅰ浚篟NA沉淀在離心前通常不可見,離心后在管側(cè)和管底形成膠狀沉淀。5)小心棄去上清,加入等體積7...
在自然界中.相對的,DNA酶活躍的條件就嚴格很多.更后,RNA不耐高溫.所以提取RNA需要偏酸,低溫,RNA酶失活的環(huán)境。育兒達人這問題問的專業(yè)性好強啊。怎么用通俗的語言講好為難。首先,要說明什么是RNA。RNA,跟DNA是一對兄弟,是DNA的轉(zhuǎn)錄表達器。如同插頭與插座的關(guān)系,實現(xiàn)遺傳信息在蛋白質(zhì)上的表達,是遺傳信息向表型轉(zhuǎn)化過程中的橋梁。RNA由核糖核苷酸經(jīng)磷酯鍵縮合而成長鏈狀分子。一個核糖核苷酸分子由磷酸,核糖和堿基構(gòu)成。RNA的堿基主要有4種,即A腺嘌呤[1],G鳥嘌呤[2],C胞嘧啶[3],U尿嘧啶[4]。其中,U尿嘧啶取代了DNA中的T胸腺嘧啶而成為RNA的特征堿基。降解就是...
輕輕吹3-5次混勻。B.輕輕混勻轉(zhuǎn)染試劑,用50ulOpti-MEM稀釋lipofectamineTM2000,輕輕吹3-5次混勻,室溫下靜置5min。C.混合轉(zhuǎn)染試劑和siRNA稀釋液,輕輕吹3-5次混勻,室溫下靜置20min。D.轉(zhuǎn)染復合物加入到24孔細胞板中,100ul/孔,前后輕搖細胞板混合均勻。E.細胞板置于37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18-48h。轉(zhuǎn)染4-6h后可更換新鮮培養(yǎng)基。3)效果檢測:轉(zhuǎn)染完成后24-72h均可進行siRNA沉默效果檢測,更佳檢測時間與細胞類型,轉(zhuǎn)染試劑,檢測目的等相關(guān)。1)RNA水平的檢測:mRNA是檢測siRNA沉默效率的更佳指標,siRNA轉(zhuǎn)...
25)植物RNA大量提取試劑盒:從小于5g新鮮或冷藏的植物組織中提取高達2mg總RNAR6629-01PlantRNAMaxiKit(5)R6629-02PlantRNAMaxiKit(20)真的菌群RNA小量提取試劑盒:從小于100mg真的菌群組織或真的菌群細胞中提取總RNAR6840-00FungalRNAKit(5)R6840-01FungalRNAKit(50)R6840-02FungalRNAKit(200)酵母RNA小量提取試劑盒:從6X107個酵母細胞中純化RNAR6870-00YeastRNAKit(5)R6870-01YeastRNAKit(50)R6870-02Ye...
50)M6225-02Mag-BindForensicDNAKit(200)96板磁珠法醫(yī)樣品提取試劑盒M1427-00EZ96MagbindForensicDNAKit(1x96)M1427-01EZ96MagbindForensicDNAKit(4x96)M1427-02EZ96MagbindForensicDNAKit(20x96)磁珠植物DNA提取試劑盒:從小于100mg植物組織中提取高分子量基因組DNAM2327-01Mag-BindPlantDNAKit(50)M2327-02Mag-BindPlantDNAKit(200)96孔磁珠植物DNA提取試劑盒:從小于100mg植...
200)SP真的菌群DNA中量提取試劑盒:從真的菌群組織或細胞中提取基因組DNAD5545-00SpFungalDNAMidiKit(2)D5545-01SpFungalDNAMidiKit(10)D5545-02SpFungalDNAMidiKit(25)HP真的菌群DNA小量抽提試劑盒D3195-00HPFungalDNAMiniKit(5)D3195-01HPFungalDNAMiniKit(50)D3195-02HPFungalDNAMiniKit(200)SQ血液DNA提取試劑盒:(溶液型抽提方式)D5032-00SQBloodDNAKit(10ml)D5032-01SQBl...
[4]。此外,部分RNA5′端或3′端有特殊的核苷酸序列,而且RNA一級結(jié)構(gòu)中沒有DNA那樣復雜的順序組織。[4]3.絕大多數(shù)RNA為單鏈分子,單鏈可自身折迭形成發(fā)夾(hairpin)樣結(jié)構(gòu)而有局部雙螺旋結(jié)構(gòu)的特征,這是各種RAN空間結(jié)構(gòu)的共同特征。RNA局部雙螺旋結(jié)構(gòu)中堿基互補配對規(guī)律是A對U和G對C。由于RNA分子內(nèi)部不能***形成堿基配對,故其堿基克分子比A不等于U,G不等于C,不存在DNA堿基比例的Chargaff規(guī)律。[4]干擾機制編輯播報1998年,美國兩位科學家安德魯·法爾和克雷格·梅洛在《自然》雜志上共同發(fā)表了有關(guān)發(fā)現(xiàn)RNA(核糖核酸)干擾機制的論文,被同行稱為“近...
輕輕吹3-5次混勻。B.輕輕混勻轉(zhuǎn)染試劑,用50ulOpti-MEM稀釋lipofectamineTM2000,輕輕吹3-5次混勻,室溫下靜置5min。C.混合轉(zhuǎn)染試劑和siRNA稀釋液,輕輕吹3-5次混勻,室溫下靜置20min。D.轉(zhuǎn)染復合物加入到24孔細胞板中,100ul/孔,前后輕搖細胞板混合均勻。E.細胞板置于37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18-48h。轉(zhuǎn)染4-6h后可更換新鮮培養(yǎng)基。3)效果檢測:轉(zhuǎn)染完成后24-72h均可進行siRNA沉默效果檢測,更佳檢測時間與細胞類型,轉(zhuǎn)染試劑,檢測目的等相關(guān)。1)RNA水平的檢測:mRNA是檢測siRNA沉默效率的更佳指標,siRNA轉(zhuǎn)...
5x96)超薄柱型PCR產(chǎn)物純化試劑盒:用低洗脫體積純化或濃縮PCR產(chǎn)物、酶切產(chǎn)物D6293-01MicroEluteCyclePureKit(50)D6293-02MicroEluteCyclePureKit(200)超薄柱型瓊脂糖凝膠回收試劑盒:用低洗膠體積純化濃縮瓊脂糖凝膠中的DNAD6294-01MicroEluteGelExtracionKit(50)D6294-02MicroEluteGelExtracionKit(200)DNA探針純化試劑盒:從標記反應中快速回收DNA探針D6538-00DNAProbePurificationKit(5)D6538-01DNAProbe...
50)總RNA小量提取試劑盒:從5×106真核細胞或30mg組織中提取100ug總RNAR6834-00TotalRNAKitI(5)R6834-01TotalRNAKitI(50)R6834-02TotalRNAKitI(200)總RNA中量提取試劑盒:從1×108個細胞/200mg組織中提取1mg總RNAR6664-00TotalRNAKitMidiKit(2)R6664-01TotalRNAKitMidiKit(10)R6664-02TotalRNAKitMidiKit(25)總RNA大量提取試劑盒:從5×108個細胞/1g組織中提取5mg總RNAR6693-01TotalRNA...
不過,這些核糖體的基本結(jié)構(gòu)和功能一致。[2]核酶科學家在研究RNA的轉(zhuǎn)錄后加工時發(fā)現(xiàn)某些RNA有催化活性,可以催化RNA的剪接,這些由活細胞合成、起催化作用的RNA稱為核酶。許多核酶的底物也是RNA,甚至就是其自身,其催化反應也具有專一性。[2]已經(jīng)闡明的天然核酶有錘頭狀核酶、發(fā)夾狀核酶、I型內(nèi)含子、Ⅱ型內(nèi)含子、丁型肝炎病毒核酶、核糖核酸酶P、肽基轉(zhuǎn)移酶等。如何評價核酶的理論意義與實際意義,如何看待核酶與傳統(tǒng)意義上的酶在代謝中的地位,都有待進一步研究。[2]1.核酶發(fā)現(xiàn)核酶更早由Cech和Altman(1989年諾貝爾化學獎獲得者)發(fā)現(xiàn)。1967年,Woese、Crick與Orge...
50)M6225-02Mag-BindForensicDNAKit(200)96板磁珠法醫(yī)樣品提取試劑盒M1427-00EZ96MagbindForensicDNAKit(1x96)M1427-01EZ96MagbindForensicDNAKit(4x96)M1427-02EZ96MagbindForensicDNAKit(20x96)磁珠植物DNA提取試劑盒:從小于100mg植物組織中提取高分子量基因組DNAM2327-01Mag-BindPlantDNAKit(50)M2327-02Mag-BindPlantDNAKit(200)96孔磁珠植物DNA提取試劑盒:從小于100mg植...
[6]必需指出:①在mRNA整個分子中,從起始信號直至終止信號,其密碼的三聯(lián)體是連續(xù)的,密碼與密碼之間沒有間隔的核苷酸;②起始信號AUG并非是mRNA的起始(5′端),而可以和5′端間隔若干個核苷酸;而且終止信號也不在mRNA的3′端。[6]tRNA作為“搬運工具”的tRNA有很多種,體內(nèi)20種氨基酸都有其自已特有的tRNA,所以,tRNA的種類不少于20種。tRNA在ATP供應能量和酶的作用下,可分別與特定的氨基酸結(jié)合。每個tRNA都有一個由三個核苷酸編成的“反密碼”。這個反密碼可以根據(jù)堿基配對的原則與mRNA上對應的密碼配對,而且只有當反密碼與mRNA上的密碼相對應時才能配合,...
(rRNA是組成核糖體的部分RNA的2-OH還在不耐堿所以提取RNA需要偏酸低溫RNA酶失活的環(huán)境)RNA的2-OH還在不耐堿所以提取RNA需要偏酸低溫RNA酶失活的環(huán)境核糖核酸(縮寫為RNA,即RibonucleicAcid),存在于生物細胞以及部分病毒、類病毒中的遺傳信息載體。RNA由核糖核苷酸經(jīng)磷酸二酯鍵縮合而成長鏈狀分子。一個核糖核苷酸分子由磷酸,核糖和堿基構(gòu)成。RNA的堿基主要有4種,即A腺嘌呤、G鳥嘌呤、C胞嘧啶、U尿嘧啶,其中,U(尿嘧啶)取代了DNA中的T。在細胞中,根據(jù)結(jié)構(gòu)功能的不同,RNA主要分三類,即tRNA、rRNA,以及mRNA。mRNA是依據(jù)DNA序列轉(zhuǎn)錄而...
操作過程要小心,帶口罩、手套避免環(huán)境中RNA酶污染樣品。RNA在水溶液中OD值可能在,但這并不表示RNA不純,需電泳檢測。使用時一定要根據(jù)自己的實驗需要購買特定使用提取試劑盒,如果不是特定使用試劑盒,或許能提出RNA,但不能確保其質(zhì)量以及完整性,會影響RT-PCR、Northernblot、Dotblot、RealtimeRTPCR、芯片分析、polyA篩選、體外翻譯、RNase保護分析、分子克隆等后續(xù)實驗的結(jié)果。當前提取效果好的是RNA提取試劑盒,但其售價較高,單次實驗費用花費太大,對精度要求不高的實驗沒有必要購買,當然還有其它的進口試劑盒,但是均存在價格高、訂貨周期長的問題(如果碰...
操作過程要小心,帶口罩、手套避免環(huán)境中RNA酶污染樣品。RNA在水溶液中OD值可能在,但這并不表示RNA不純,需電泳檢測。使用時一定要根據(jù)自己的實驗需要購買特定使用提取試劑盒,如果不是特定使用試劑盒,或許能提出RNA,但不能確保其質(zhì)量以及完整性,會影響RT-PCR、Northernblot、Dotblot、RealtimeRTPCR、芯片分析、polyA篩選、體外翻譯、RNase保護分析、分子克隆等后續(xù)實驗的結(jié)果。當前提取效果好的是RNA提取試劑盒,但其售價較高,單次實驗費用花費太大,對精度要求不高的實驗沒有必要購買,當然還有其它的進口試劑盒,但是均存在價格高、訂貨周期長的問題(如果碰...
[5]安德魯·法爾1959年出生在美國加利福尼亞州圣克拉拉縣,本科在加利福尼亞大學伯克利分校主修數(shù)學,只用3年時間就拿到了學位。1983年獲美國麻省理工學院生物學博士學位。他逐漸對涉及生命奧秘的遺傳學產(chǎn)生了興趣,并將其作為自己終身的學術(shù)追求。[5]克雷格·梅洛生于1960年,他的父親是一名古生物學家,梅洛童年時經(jīng)常跟著父親在美國西部尋找化石。[5]高中時代,梅洛的興趣逐漸轉(zhuǎn)移到了基因工程方面。當時科學家克隆了人類胰島素基因,并將其DNA(脫氧核糖核酸)置入到細菌中,這樣就可以人工合成無限多的胰島素。這一成果為全球數(shù)百萬糖尿病患者帶來了福音。梅洛回憶說:“科學研究能夠真正地對人類健康...
[2]③反密碼子臂和反密碼子環(huán),特征是反密碼子環(huán)含反密碼子。反密碼子5′端與尿苷酸連接,3′端與嘌呤核苷酸連接。TΨC臂(T臂)和TΨC環(huán)(Ψ環(huán)),特征是TΨC環(huán)含胸腺嘧啶核糖核苷酸T54假尿苷酸Ψ55胞苷酸C56。[2]④額外環(huán)3~21nt。[2],氨基酸結(jié)合位點位于其一端,反密碼子環(huán)位于其另一端,DHU環(huán)和TΨC環(huán)雖然在二級結(jié)構(gòu)中位于兩側(cè),但在三級結(jié)構(gòu)中卻相鄰。盡管各種tRNA的長度和序列不盡相同,但其三級結(jié)構(gòu)相似,提示三級結(jié)構(gòu)與其功能密切相關(guān)。[2]核糖體RNA核糖體RNA(rRNA)與核糖體蛋白構(gòu)成一種稱為核糖體的關(guān)鍵白顆粒。一個大腸桿菌中約有15000個核糖體。[2]1....
50)M6225-02Mag-BindForensicDNAKit(200)96板磁珠法醫(yī)樣品提取試劑盒M1427-00EZ96MagbindForensicDNAKit(1x96)M1427-01EZ96MagbindForensicDNAKit(4x96)M1427-02EZ96MagbindForensicDNAKit(20x96)磁珠植物DNA提取試劑盒:從小于100mg植物組織中提取高分子量基因組DNAM2327-01Mag-BindPlantDNAKit(50)M2327-02Mag-BindPlantDNAKit(200)96孔磁珠植物DNA提取試劑盒:從小于100mg植...
血液是針對RNA表達研究和血液生物標志物探索的***常規(guī)人體組織,因為它可以被很容易地收集。由于血液一開始就在兩小時內(nèi)的室溫下被分解,因此立即凍結(jié)樣本或添加穩(wěn)定劑是十分重要的。對于**準確的基因表達分析和分析結(jié)果,我們建議穩(wěn)定RNA純化前的血液。通過穩(wěn)定的血液做實驗:提供即時及穩(wěn)定的宿主基因轉(zhuǎn)錄允許收集和分析之間的延遲(實地工作)允許樣品長期存放血漿且有非常高的核糖核酸(RNase)活性,比較大限度地減少這種活性是所有血液RNA分離過程的關(guān)鍵。LifeTechnologies針對穩(wěn)定血液樣本中的RNA提供了兩個選項;血液樣本可直接繪制成Tempus?血液RNA管,它含有一個穩(wěn)定的試劑,...
用于各種植物、動物、微生物的RNA提取,在每個試劑盒里都有一份說明使用說明書。實驗者只需要按照說明書上的步驟操作即可。使用時無需配制其它試劑,非常方便,適合于RNA的快速提取。所提取的RNA完整性好、純度高,可用于分子生物學后實驗。但較好的試劑盒價格比較貴,在實驗室可以根據(jù)自己的實驗需要來定奪試劑盒的使用。中文名RNA試劑盒應用領(lǐng)域分子生物學作用提取細胞內(nèi)總RNA目錄1試劑組成2操作步驟3注意事項4替代方法RNA試劑盒試劑組成編輯(以離心柱型為例):一般包括:成分數(shù)量儲藏溫度有效期裂解液100ml2-8℃一年漂洗液30mlRT一年洗柱液100mlRT一年RNasefreeddH2O30...
50)總RNA小量提取試劑盒:從5×106真核細胞或30mg組織中提取100ug總RNAR6834-00TotalRNAKitI(5)R6834-01TotalRNAKitI(50)R6834-02TotalRNAKitI(200)總RNA中量提取試劑盒:從1×108個細胞/200mg組織中提取1mg總RNAR6664-00TotalRNAKitMidiKit(2)R6664-01TotalRNAKitMidiKit(10)R6664-02TotalRNAKitMidiKit(25)總RNA大量提取試劑盒:從5×108個細胞/1g組織中提取5mg總RNAR6693-01TotalRNA...
18g)2210R8042-03SQDNARNAproteinKit(36g)4528R8042-04SQDNARNAproteinKit(72g)8694mRNA純化試劑盒:用Oligo(dt)纖維素從總RNA或組織中純化PolyAmRNAR6511-01mRNAEnrichmentKit(10preps)1580R6511-02mRNAEnrichmentKit(30preps)4560磁珠MRNA提取試劑盒:R6570-01Mag-BindmRNAKit(10)1485R6570-02Mag-BindmRNAKit(30)3780磁珠MRNA提取試劑盒:不帶總RNA提取試劑R65...