RNA上樣緩沖液簡介RNA上樣緩沖液是分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中用于RNA電泳分析的一種輔助試劑。它通過提供適當(dāng)?shù)慕橘|(zhì)和條件,幫助RNA樣品在凝膠中有效遷移和分離。功能樣品沉降:增加樣品的密度,使其更容易沉入凝膠孔中。電泳指示:含有染料,如溴酚藍(lán)或二甲苯青,幫助觀察樣品遷移。樣品保護(hù):在電泳過程中保護(hù)RNA分子,減少降解。使用方法樣品準(zhǔn)備:將RNA樣品與上樣緩沖液混合,通常按1:1的比例。變性處理:對于需要變性的電泳,樣品可與甲醛混合并加熱變性。上樣:將混合后的樣品加入凝膠孔中。電泳:在電場作用下進(jìn)行電泳,觀察RNA的片段的遷移。保存建議短期:4℃保存,可保持一個(gè)月。長期:-20℃保存,可延長有效期至兩年。注意事項(xiàng):避免RNase污染:在處理RNA樣品時(shí),必須使用無RNase的設(shè)備和耗材,避免RNA降解。操作安全:由于含有甲醛等有害成分,操作時(shí)應(yīng)佩戴適當(dāng)?shù)姆雷o(hù)裝備,如手套、口罩和防護(hù)眼鏡。染色和檢測:電泳結(jié)束后,可以使用溴乙錠(EtBr)或SYBRGold等核酸染料對凝膠進(jìn)行染色,然后在紫外光下觀察RNA條帶。RNA上樣緩沖液的使用可以確保RNA樣品在電泳過程中的穩(wěn)定性和均勻遷移,從而獲得準(zhǔn)確的電泳結(jié)果。AdvanceFast PCR Master Mix (2×) (With Dye) 采用了優(yōu)化的高保真DNA聚合酶和反應(yīng)體系能夠?qū)崿F(xiàn)超快速的PCR擴(kuò)增。北京酶定向進(jìn)化技術(shù)服務(wù)技術(shù)服務(wù)
除了His標(biāo)簽和GST標(biāo)簽,還有多種融合伴侶技術(shù)可以用于提高蛋白的表達(dá)和純度,包括但不限于以下幾種:1.Flag標(biāo)簽:Flag是一個(gè)八肽序列(DYKDDDDK),可以通過抗Flag標(biāo)簽的抗體進(jìn)行免疫沉淀或西方印跡分析,有助于提高蛋白的純度。2.Fc融合蛋白:Fc標(biāo)簽是免疫球蛋白的恒定區(qū),可以提高蛋白在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中的溶解性和穩(wěn)定性,并且可以通過蛋白A親和層析進(jìn)行純化。3.人血清白蛋白(HSA):HSA作為融合伴侶可以提高蛋白的溶解性和穩(wěn)定性,延長半衰期,并通過其固有的結(jié)合特性進(jìn)行純化。4.轉(zhuǎn)鐵蛋白:轉(zhuǎn)鐵蛋白可以作為融合伴侶,利用其與鐵的高親和力進(jìn)行純化,并且有助于提高蛋白的穩(wěn)定性。5.XTEN聚合物:XTEN是一種柔性的多肽聚合物,可以提高蛋白的溶解性和穩(wěn)定性,有助于防止聚集。6.彈性蛋白樣多肽(ELP):ELP具有可逆的熱響應(yīng)性質(zhì),可以通過溫度誘導(dǎo)的相分離進(jìn)行純化,有助于提高純度。7.Strep標(biāo)簽:Strep標(biāo)簽是一個(gè)短肽序列,可以通過Strep-Tactin親和層析進(jìn)行高效率的純化。8.MBP融合蛋白:麥芽糖結(jié)合蛋白(MBP)可以作為融合伴侶,提高蛋白的溶解性,并通過親和層析進(jìn)行純化。。河北酵母表達(dá)高通量篩選技術(shù)服務(wù)開發(fā)Taq PCR Master Mix With Dye 是一款專為滿足科研需求而設(shè)計(jì)的即用型預(yù)混液憑借其性能和便捷的使用方式。
DNA Marker I Plus:精細(xì)的DNA分子量標(biāo)準(zhǔn)DNA Marker I Plus 是一種即用型的DNA分子量標(biāo)準(zhǔn),廣應(yīng)用于瓊脂糖凝膠電泳中,用于估算DNA片段的大小和進(jìn)行粗略定量。它由7條線狀雙鏈DNA條帶組成,覆蓋100 bp至700 bp的范圍,特別適合用于小片段DNA的分析。產(chǎn)品特點(diǎn)組成:包含100 bp、200 bp、300 bp、400 bp、500 bp、600 bp和700 bp的DNA條帶,其中400 bp條帶加亮顯示。即用型設(shè)計(jì):已預(yù)混1×Loading Buffer,使用時(shí)無需額外添加,直接上樣。清晰的條帶:電泳圖像清晰,背景干凈,條帶亮度均勻。穩(wěn)定性高:在室溫下可穩(wěn)定保存三個(gè)月,長期保存建議置于-20℃。注意事項(xiàng)保存條件:建議低溫保存,避免反復(fù)凍融,以防止核酸酶污染導(dǎo)致條帶降解。避免加熱:使用前無需加熱,直接上樣。電泳緩沖液:及時(shí)更換電泳緩沖液,使用高質(zhì)量的瓊脂糖,以獲得比較好分離效果。染料選擇:如果使用Goldview等染料,由于靈敏度較低,建議適當(dāng)增加Marker的上樣量。應(yīng)用場景DNA Marker I Plus 適用于常規(guī)PCR產(chǎn)物、基因組DNA片段等的大小鑒定,特別適合需要精確測定DNA片段大小的實(shí)驗(yàn),如基因編輯驗(yàn)證、小片段插入/缺失分析等。
Tris-硼酸電泳緩沖液(5×TBE, RNase free):RNA電泳的可靠選擇Tris-硼酸電泳緩沖液(5×TBE, RNase free)是一種為RNA電泳設(shè)計(jì)的緩沖液,廣應(yīng)用于分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中。其主要成分包括450 mM Tris-硼酸、10 mM EDTA和DEPC處理水。這種配方經(jīng)過特殊處理,確保無RNase污染,能夠有效保護(hù)RNA樣品免受降解。產(chǎn)品特點(diǎn)與優(yōu)勢無RNase污染:該緩沖液經(jīng)過DEPC處理,確保無RNase污染,適用于RNA電泳。高效分離:TBE緩沖液的緩沖能力較弱,適合分離小于2000 bp的DNA或RN片段。兼容性強(qiáng):適用于多種類型的瓊脂糖凝膠電泳,兼容常見的核酸染料(如EB或GoldView)。穩(wěn)定性高:5×TBE濃縮液比10×TBE更穩(wěn)定,不易產(chǎn)生沉淀,適合長期儲存。使用方法稀釋緩沖液:使用時(shí)需用DEPC處理水或其他RNase-free的純水將5×TBE稀釋為0.5×TBE或1×TBE工作液。制備凝膠:用稀釋后的TBE緩沖液制備瓊脂糖凝膠。電泳操作:將RNA樣品加入凝膠孔中,使用稀釋后的TBE緩沖液進(jìn)行電泳。染色與觀察:電泳結(jié)束后,使用RNase-free的核酸染料對凝膠進(jìn)行染色,并在紫外透射儀下觀察結(jié)果。保存與注意事項(xiàng)保存條件:Tris-硼酸電泳緩沖液(5×TBE, RNase free)應(yīng)保存在室溫或4℃條件下,避免長時(shí)間暴露在高溫或強(qiáng)光下。dNTP Mix憑借其高純度高濃度穩(wěn)定性強(qiáng)和配比等特點(diǎn),以及高效擴(kuò)增兼容性強(qiáng)和降低污染風(fēng)險(xiǎn)等性能優(yōu)勢。
這項(xiàng)技術(shù)服務(wù)在多個(gè)領(lǐng)域展現(xiàn)出了巨大的應(yīng)用潛力。在疫苗研發(fā)領(lǐng)域,VLP作為一種新型的疫苗候選物,具有良好的免疫原性,能夠誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生強(qiáng)烈的免疫反應(yīng)。江畢赤酵母表達(dá)的VLP疫苗可以針對多種病毒性疾病,為預(yù)防和控制傳染病提供了創(chuàng)新的解決方案。例如,在應(yīng)對一些新興病毒威脅時(shí),VLP疫苗能夠快速啟動(dòng)研發(fā)和生產(chǎn),為公眾健康提供及時(shí)的保護(hù)。此外,在生物醫(yī)學(xué)研究中,VLP還可以作為藥物載體或診斷試劑的重要組成部分,用于疾病的和檢測。Ultra-Long Master Mix 能夠兼容多種類型的模板,包括基因組DNA、質(zhì)粒DNA、cDNA以及粗提的動(dòng)植物組織核酸等。遼寧重組蛋白表達(dá)服務(wù)技術(shù)服務(wù)開發(fā)
DL10000 DNA Marker廣泛應(yīng)用于多種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)場景,如基因組DNA分析、質(zhì)粒DNA的酶切分析等。北京酶定向進(jìn)化技術(shù)服務(wù)技術(shù)服務(wù)
HPV病毒樣顆粒(Virus-LikeParticles,VLPs)表達(dá)服務(wù)技術(shù)是用于生產(chǎn)疫苗的關(guān)鍵技術(shù),它涉及到利用生物技術(shù)手段在宿主細(xì)胞中表達(dá)HPV的主要衣殼蛋白L1,這些蛋白能夠自組裝成具有病毒樣顆粒結(jié)構(gòu)的VLPs,從而用于疫苗制備。以下是畢赤酵母表達(dá)系統(tǒng)在表達(dá)HPVVLPs時(shí)的一些優(yōu)化策略:1.分子水平策略:通過分子水平的策略,如優(yōu)化密碼子使用,提高基因在畢赤酵母中的表達(dá)效率和蛋白質(zhì)構(gòu)象的正確性。2.信號肽篩選:選擇合適的信號肽以提高重組蛋白分泌到培養(yǎng)基中的效率,從而增加VLPs的產(chǎn)量。3.敲除蛋白酶基因:通過基因編輯技術(shù)敲除畢赤酵母中的蛋白酶基因,減少外源蛋白被降解的風(fēng)險(xiǎn)。4.共表達(dá)促折疊因子:共表達(dá)分子伴侶或促折疊因子,幫助正確折疊和組裝VLPs,提高其穩(wěn)定性和免疫原性。5.多拷貝數(shù)外源基因:使用多拷貝質(zhì)?;蚧蛘霞夹g(shù),提高外源基因的拷貝數(shù),增加蛋白表達(dá)量。6.發(fā)酵條件優(yōu)化:通過優(yōu)化發(fā)酵條件,如溫度、pH、碳源等,提高VLPs的表達(dá)量和質(zhì)量。7.基因編輯技術(shù):利用CRISPR/Cas9等基因編輯技術(shù)對畢赤酵母進(jìn)行遺傳改造,提高外源蛋白的表達(dá)。北京酶定向進(jìn)化技術(shù)服務(wù)技術(shù)服務(wù)