Tris-磷酸電泳緩沖液(10×TPE):高效、穩(wěn)定的電泳緩沖液Tris-磷酸電泳緩沖液(10×TPE)是一種廣應(yīng)用于分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的高效緩沖液,尤其適用于核酸電泳。其主要成分包括900 mM Tris-磷酸和20 mM EDTA。這種緩沖液經(jīng)過(guò)特殊處理,能夠提供穩(wěn)定的pH環(huán)境,確保核酸在電泳過(guò)程中的完整性和清晰的分離效果。產(chǎn)品特點(diǎn)高效分離:10×TPE緩沖液在稀釋為1×工作液后,能夠提供穩(wěn)定的pH值和離子強(qiáng)度,特別適合分離小片段核酸。穩(wěn)定性高:該緩沖液的高濃度設(shè)計(jì)使其在儲(chǔ)存和使用過(guò)程中更加穩(wěn)定,不易受環(huán)境因素影響。兼容性強(qiáng):適用于多種核酸染料(如EB或GoldView),并可用于瓊脂糖凝膠電泳。RNase-free:某些品牌提供無(wú)RNase污染的版本,適用于RNA電泳。使用方法稀釋?zhuān)菏褂脮r(shí)需將10×TPE緩沖液用去離子水稀釋至1×工作液,例如取10 mL的10×TPE加入90 mL去離子水。制備凝膠:用稀釋后的1×TPE緩沖液制備瓊脂糖凝膠。電泳操作:將核酸樣品加入凝膠孔中,使用1×TPE緩沖液進(jìn)行電泳。染色與觀察:電泳結(jié)束后,使用合適的核酸染料對(duì)凝膠進(jìn)行染色,并在紫外透射儀下觀察結(jié)果。注意事項(xiàng)避免污染:使用時(shí)需注意避免核酸酶污染,確保實(shí)驗(yàn)環(huán)境和試劑的純凈。通過(guò)與樣品條帶的對(duì)比,研究人員可以快速判斷目標(biāo)DNA片段的大小。天津大腸桿菌表達(dá)VLP技術(shù)服務(wù)
DNA Marker VII:精細(xì)助力分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)在分子生物學(xué)研究中,DNA Marker VII是一種廣使用的DNA分子量標(biāo)準(zhǔn),主要用于瓊脂糖凝膠電泳中分析DNA片段的大小。它由6條帶狀雙鏈DNA條帶組成,覆蓋300 bp到2500 bp的分子量范圍,具體條帶大小分別為300 bp、500 bp、1000 bp、1500 bp、2000 bp和2500 bp。DNA Marker VII具有明顯的實(shí)驗(yàn)優(yōu)勢(shì)。其中,1500 bp的條帶濃度為100 ng/5 μL,顯示為加亮帶,便于快速定位和半定量分析,而其他條帶濃度約為50 ng/5 μL。此外,該產(chǎn)品已預(yù)混1×loading buffer,可直接取2-5 μL進(jìn)行電泳,操作簡(jiǎn)便,電泳圖像清晰。在實(shí)驗(yàn)中,DNA Marker VII適用于多種瓊脂糖凝膠濃度,建議電泳條件為1.0%的凝膠濃度、5-7 cm的凝膠長(zhǎng)度、4-10 V/cm的電壓,電泳時(shí)間約為20-25分鐘。通過(guò)EB染色或Goldview等染料進(jìn)行染色后,可在紫外燈下清晰觀察條帶。DNA Marker VII的保存條件為-20℃,有效期可達(dá)一年,短期頻繁使用可置于4℃保存。它不僅適用于DNA片段大小的確定,還可用于DNA含量的粗略定量,但不適用于精確定量??傊?,DNA Marker VII憑借其清晰的條帶、便捷的操作和穩(wěn)定的性能,已成為分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中不可或缺的工具,為科研人員提供了可靠的分子量參考。河北漢遜酵母表達(dá)人膠原蛋白技術(shù)服務(wù)技術(shù)服務(wù)DL1000 DNA Marker能夠?yàn)檠芯咳藛T提供準(zhǔn)確的分子量參考,幫助快速估算目標(biāo)DNA片段的大小。
CRISPR-Cas9技術(shù)在金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)基因組編輯中的應(yīng)用主要體現(xiàn)在以下幾個(gè)方面:1.基因敲除與功能研究:通過(guò)設(shè)計(jì)特定的sgRNA,利用CRISPR-Cas9技術(shù)可以高效地在金黃色葡萄球菌基因組中實(shí)現(xiàn)基因敲除,進(jìn)而研究這些基因的功能。例如,研究者利用CRISPR-Cas9技術(shù)成功構(gòu)建了srtA基因敲除的金黃色葡萄球菌,分析其對(duì)菌株毒力的影響。2.耐藥性研究手段開(kāi)發(fā):金黃色葡萄球菌,特別是耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)和耐萬(wàn)古霉素金黃色葡萄球菌(VRSA),因其耐藥性帶來(lái)了巨大挑戰(zhàn)。CRISPR-Cas9技術(shù)可用于研究耐藥機(jī)制,并開(kāi)發(fā)新型手段。季泉江教授課題組與韓大力研究員課題組合作,在金黃色葡萄球菌中建立了單堿基編輯技術(shù),有助于加快耐藥機(jī)制研究和藥物靶標(biāo)發(fā)現(xiàn)。3.基因編輯技術(shù)的優(yōu)化:CRISPR-Cas9技術(shù)在金黃色葡萄球菌中的應(yīng)用還包括對(duì)編輯技術(shù)的優(yōu)化。例如,研究者開(kāi)發(fā)了基于CRISPR/Cas9的單質(zhì)粒系統(tǒng),允許在金黃色葡萄球菌中進(jìn)行快速有效的染色體操作,該系統(tǒng)可以實(shí)現(xiàn)無(wú)標(biāo)記、和快速的遺傳操作,加速了金黃色葡萄球菌基因功能的研究。
Tris-乙酸電泳緩沖液(50×TAE, RNase free):RNA電泳的可靠保障在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,RNA的分離和分析是研究基因表達(dá)和調(diào)控的重要環(huán)節(jié)。然而,RNA的穩(wěn)定性較差,容易被RNase降解,因此在RNA電泳實(shí)驗(yàn)中,使用無(wú)RNase污染的緩沖液至關(guān)重要。Tris-乙酸電泳緩沖液(50×TAE, RNase free)憑借其無(wú)RNase污染、高效分離和經(jīng)濟(jì)實(shí)用的特點(diǎn),成為RNA電泳的理想選擇。產(chǎn)品特點(diǎn)與優(yōu)勢(shì)Tris-乙酸電泳緩沖液(50×TAE, RNase free)是一種高濃度、無(wú)RNase污染的緩沖液,主要成分包括Tris(三羥甲基氨基甲烷)、乙酸和EDTA(乙二胺四乙酸)。這種配方能夠在電泳過(guò)程中提供穩(wěn)定的pH環(huán)境,確保RNA的完整性。無(wú)RNase污染:經(jīng)過(guò)特殊處理,確保無(wú)RNase污染,能夠有效保護(hù)RNA樣品免受降解。高效分離:TAE緩沖液具有較低的離子強(qiáng)度,適合分離大分子量的RN片段。它能夠在電泳過(guò)程中提供穩(wěn)定的電流,確保RNA條帶清晰。經(jīng)濟(jì)實(shí)用:50×的高濃度設(shè)計(jì)使得該緩沖液在使用時(shí)可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求靈活稀釋?zhuān)瑴p少浪費(fèi),降低實(shí)驗(yàn)成本。兼容性強(qiáng):適用于多種類(lèi)型的瓊脂糖凝膠電泳,兼容常見(jiàn)的核酸染料(如EB或GoldView),滿(mǎn)足不同實(shí)驗(yàn)需求。DNA Marker VII是一種廣使用的DNA分子量標(biāo)準(zhǔn),主要用于瓊脂糖凝膠電泳中分析DNA片段的大小。
DNA Marker V:分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中的重要工具在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,DNA Marker V是一種廣使用的DNA分子量標(biāo)準(zhǔn),主要用于瓊脂糖凝膠電泳中分析DNA片段的大小。它由多條已知長(zhǎng)度的線(xiàn)性雙鏈DNA片段組成,覆蓋從250 bp到5,500 bp的范圍。這些片段已溶解于1×Loading Buffer中,使用時(shí)可直接取5-10 μl進(jìn)行電泳,操作非常便捷。DNA Marker V的條帶清晰、亮度均勻,能夠?yàn)閷?shí)驗(yàn)人員提供準(zhǔn)確的分子量參考。其中,某些條帶(如1,000 bp或2,000 bp)通常被設(shè)計(jì)為加亮帶,以便于快速定位和半定量分析。此外,該產(chǎn)品在室溫下可穩(wěn)定保存3-6個(gè)月,長(zhǎng)期保存則建議置于4℃或-20℃。在實(shí)驗(yàn)中,DNA Marker V能夠幫助研究人員快速估算目標(biāo)DNA片段的大小,并通過(guò)與樣品條帶的對(duì)比,初步判斷DNA片段的濃度。例如,在PCR產(chǎn)物分析或基因克隆實(shí)驗(yàn)中,DNA Marker V為電泳結(jié)果的解讀提供了重要的參考依據(jù)。DNA Marker V的使用也非常靈活。它適用于不同濃度的瓊脂糖凝膠,用戶(hù)可以根據(jù)目標(biāo)片段的大小選擇合適的凝膠濃度。此外,該產(chǎn)品還建議在電泳時(shí)使用新鮮配制的瓊脂糖凝膠和緩沖液,以確保比較好的分離效果。
Cre/LoxP系統(tǒng)適用于真核和原核生物,廣泛應(yīng)用于基因敲除、插入、翻轉(zhuǎn)和易位等操作。天津大腸桿菌表達(dá)VLP技術(shù)服務(wù)
酵母表達(dá)高通量篩選技術(shù)在藥物發(fā)現(xiàn)中相比其他表達(dá)系統(tǒng)具有一些獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)和局限性。優(yōu)勢(shì):1.真核表達(dá)系統(tǒng):酵母作為真核生物,能夠進(jìn)行復(fù)雜的蛋白質(zhì)折疊和翻譯后修飾,如糖基化,這使得其表達(dá)的蛋白質(zhì)更接近天然形式,有助于藥物的活性和穩(wěn)定性。2.高通量篩選能力:通過(guò)液滴微流控技術(shù),可以實(shí)現(xiàn)單細(xì)胞水平的高通量篩選,快速?gòu)拇罅客蛔凅w中篩選出表達(dá)量高的菌株,提高篩選效率。3.成本效益:與傳統(tǒng)的微孔板篩選方法相比,液滴微流控篩選技術(shù)可以降低試劑成本,實(shí)現(xiàn)更經(jīng)濟(jì)的篩選過(guò)程。4.易于操作和培養(yǎng):酵母細(xì)胞易于在實(shí)驗(yàn)室條件下培養(yǎng),且培養(yǎng)條件相對(duì)簡(jiǎn)單,有助于藥物發(fā)現(xiàn)過(guò)程中的規(guī)?;a(chǎn)。局限性:1.表達(dá)量問(wèn)題:盡管酵母系統(tǒng)在表達(dá)外源蛋白方面具有優(yōu)勢(shì),但對(duì)于一些蛋白質(zhì),其表達(dá)量可能仍然低于某些原核系統(tǒng),如大腸桿菌。2.遺傳操作復(fù)雜性:與原核生物相比,酵母的遺傳操作更為復(fù)雜,可能需要更多的時(shí)間和技巧來(lái)進(jìn)行基因編輯和表達(dá)載體的構(gòu)建。3.糖基化模式差異:酵母的糖基化模式與哺乳動(dòng)物細(xì)胞存在差異,這可能影響蛋白質(zhì)的生物學(xué)功能和免疫原性,對(duì)于某些藥物開(kāi)發(fā)來(lái)說(shuō)可能是一個(gè)挑戰(zhàn)。天津大腸桿菌表達(dá)VLP技術(shù)服務(wù)