核酸提取效果不好，多加點(diǎn)磁珠？有很多實(shí)驗(yàn)者喜歡在提取效果不佳的時(shí)候，增加磁珠的用量，認(rèn)為磁珠多加一點(diǎn)，就能吸上更多的核酸，不得不說這種想法是不可取的。過多的磁珠將因?yàn)闊o法均勻分散于液體中，而喪失其分散的特性，也使得洗滌過程中無法充分增加核酸磁珠和液體接觸的效率。而且過多的磁珠也會(huì)吸附更多的雜質(zhì)，對(duì)除雜效果影響很大。甚至有些時(shí)候，過多的磁珠會(huì)吸附蛋白酶、溶菌酶等在液體體系中起主要作用的功能成分，導(dǎo)致整個(gè)試劑盒效率低下。有很多時(shí)候，在提取效果不佳的時(shí)候，減少磁珠使用量，反而是提升提取效果的途徑。很多實(shí)驗(yàn)人員在篩選試劑過程中都是在已經(jīng)成熟磁珠體系下，簡(jiǎn)單地等量替換試劑，用于比較試劑效果。這樣就會(huì)很容易得出某種試劑效果不好的結(jié)論，但實(shí)際上，由于不同試劑適合的體系和用量是不同的，往往需要調(diào)整過后才能獲得更好的提取效果?？偠灾?，在使用磁珠進(jìn)行核酸提取時(shí)，合適的試劑配合適量的磁珠，才能達(dá)到好的核酸提取效果。核酸提取的質(zhì)量要求。深圳支原體DNA提取常見問題

磁珠法核酸提取常見問題之磁珠結(jié)塊：導(dǎo)致磁珠結(jié)塊的可能原因：①磁珠吸附了過多雜質(zhì)，包括蛋白、脂質(zhì)、多糖等；②磁珠粒徑太小；③洗滌完畢，乙醇干燥時(shí)間過長(zhǎng)。④磁珠磁吸附時(shí)間過長(zhǎng)；⑤操作中途含磁珠的樣品管離心速率過高、離心時(shí)間過長(zhǎng)；磁珠結(jié)塊的解決辦法：①優(yōu)化裂解液、結(jié)合液配方，將雜質(zhì)裂解并充分消化；②選擇粒徑較大的微球；③縮短干燥時(shí)間；④控制磁珠吸附時(shí)間，磁分離時(shí)，待液體變澄清即可將液體吸棄，并及時(shí)將EP管從磁力架上取出；⑤操作過程中切勿高速或長(zhǎng)時(shí)間離心；深圳支原體DNA提取常見問題南京正揚(yáng)宿主細(xì)胞殘留核酸提取試劑盒的裝量是多少？

磁珠法核酸提取產(chǎn)品，磁珠如何與核酸結(jié)合實(shí)現(xiàn)提取功能？核酸作為一種生物大分子，之所以能夠在水溶液中穩(wěn)定分散不沉淀，是由于三種非共價(jià)作用力的存在：（1）靜電相互作用（2）范德華力（3）氫鍵。核酸分子具有多個(gè)磷酸基團(tuán)，呈現(xiàn)高度負(fù)電性，分子間互相排斥從而避免發(fā)生團(tuán)聚。此外，核酸分子在水溶液中通過氫鍵與范德華力結(jié)合了大量的水分子在其周圍，形成一個(gè)水化層，也阻止了分子間的聚集。因此，要使得核酸分子結(jié)合到磁珠表面，就必須削弱上述作用力，屏蔽溶液中的靜電斥力，同時(shí)破壞核酸分子表面的水化層，使其能夠與磁珠表面相接觸，進(jìn)而產(chǎn)生吸附。

用qPCR法進(jìn)行宿主細(xì)胞DNA殘留檢測(cè)時(shí)，哪些因素會(huì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性和方法靈敏度存在較大影響？樣品核酸提取純化過程雜質(zhì)干擾的去除對(duì)qPCR法宿主細(xì)胞殘留DNA檢測(cè)結(jié)果有著較大影響。樣品核酸提取純化操作步驟對(duì)DNA檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確度影響較大，通常采用加樣回收試驗(yàn)來進(jìn)行驗(yàn)證并確定可接受的偏離限度，內(nèi)標(biāo)回收率在50-150%的范圍內(nèi)都可以接受。樣品提取步驟較為復(fù)雜，需要特別注意，操作不當(dāng)不但可能影響回收率還可能引入環(huán)境污染。123磁珠法核酸提取流程。

磁珠法核酸提取常見問題之核酸得率低：核酸得率低的可能原因：①磁珠吸附能力較弱，只能結(jié)合溶液中少量的核酸；②磁珠洗脫方法不正確導(dǎo)致核酸洗脫效率較弱；③所使用的提取試劑（pH、鹽、醇）與該磁珠不匹配；④樣品對(duì)所用提取試劑有抑制；核酸得率低的解決辦法：①改變表面基團(tuán)種類及密度；②減少洗脫前的干燥時(shí)間；③洗脫時(shí)將樣品至于56℃孵育，加熱促進(jìn)核酸洗脫；④優(yōu)化試劑配方，使配方與所選磁珠相匹配；④更換與提取試劑匹配的磁珠；磁珠法核酸提取試劑盒。寧波RCL核酸提取操作流程

磁珠法核酸提取試劑盒需要用磁力架嗎？深圳支原體DNA提取常見問題

南京正揚(yáng)生物科技有限公司自主研發(fā)生產(chǎn)的宿主細(xì)胞殘留DNA提取試劑盒，應(yīng)用于各種類型生物制品的中間品、半成品、原液、終產(chǎn)品樣本中提取微量的宿主細(xì)胞DNA。試劑盒采用特別修飾的氧化硅納米磁性微球在獨(dú)特緩沖體系和外加磁場(chǎng)的作用下，可從復(fù)雜生物樣本中提取微量DNA并純化得到高純度DNA。主要用于生物制品樣本中的微量DNA提取，滿足復(fù)雜基質(zhì)（高蛋白、高鹽、低pH等）樣品的性能驗(yàn)證要求，與本公司多種宿主細(xì)胞核酸定量檢測(cè)試劑盒和片段分析試劑盒配套使用。深圳支原體DNA提取常見問題