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大小鼠肺動脈高壓PH動物模型多少錢?

來源: 發(fā)布時間:2024-07-29

大小鼠肺動脈高壓PH動物模型多少錢?方法不同價格不同


01 野百合堿誘導模型

野百合堿(MCT)是從野百合種子中提取的一種吡、咯、烷生物堿,它能夠引起肝毒性和肺動脈高壓。


MCT模型的特征在于內(nèi)皮細胞凋亡和血管周圍炎癥,這與人肺動脈高壓發(fā)病的生理病理機制類似。MCT模型能夠更好地幫助我們了解肺血管重塑的過程以及炎癥反應在其發(fā)病機制的重要作用。且模型具有技術(shù)簡單、可重復、時間短、穩(wěn)定性好、低成本等優(yōu)點。

造模步驟

1、將雄性SD大鼠(200~250g)隨機分為空白對照組和野百合堿實驗組。


2、將野百合堿組大鼠一次性皮下注射MCT (60mg/kg體重),根據(jù)體重向?qū)φ战M大鼠注射等量的無菌生理鹽水。


3、將兩組大鼠置于相同環(huán)境SPF飼養(yǎng)室中,保證飲水和糧食,自由采食, 并每天檢查一次。


4、分別在注射完MCT后兩周和四周取材,每個時間點各取出6只進行 采樣表征研究。


超聲檢測結(jié)束后,右心導管檢測顯示野百合堿肺動脈高壓組右心室收縮壓較對照組明顯升高;隨后稱量實驗大鼠右心室質(zhì)量、左心室及室間隔質(zhì)量,結(jié)果顯示與對照組相比,野百合堿肺動脈高壓組 RV/(LV +S) 比值升高。



實驗組大鼠肺組織 HE 染色檢測


相對于對照組,模型組大鼠肺組織形態(tài)學指標出現(xiàn)明顯變化,出現(xiàn)血管內(nèi)皮細胞損傷,細胞分布不均,動脈管壁明顯增厚伴玻璃樣變,小動脈管腔狹窄,肌化明顯,肺組織有大量炎性細胞浸潤,肺血管密度變小。


02 低氧誘導模型


低氧性肺動脈高壓是臨床常見的一類,常由慢性呼吸系統(tǒng)疾病,如慢性阻塞性肺疾病、睡眠呼吸暫停、高原病等導致。慢性缺氧會引起內(nèi)皮細胞損傷,以致相關(guān)舒縮因子失衡,增加肺血管收縮反應并促進血管重塑,*終發(fā)展為肺動脈高壓。近年來缺氧性肺血管收縮和肺動脈重塑的研究主要側(cè)重于內(nèi)皮素-1、一氧化氮、環(huán)氧合酶和腺嘌呤核苷酸途徑。


大小鼠造模步驟


1、將低氧箱氧氣濃度預設(shè)為10%,選擇成年雄性C57小鼠/SD大鼠 作為本次試驗的對象,分別設(shè)置空白組和低氧組 。

2、將低氧組小鼠/大鼠置于低氧箱中,并打開籠蓋以便充分保證箱內(nèi)空氣循環(huán),保證充足飲食。并在箱內(nèi)放置除濕盒和鈉石灰,以保證箱內(nèi)空氣正常濕度和CO2濃度。

3、每天檢查一次小鼠狀況,每周更換墊料、除濕盒和鈉石灰。對照組動物置于相同環(huán)境常氧飼養(yǎng)室,除氧氣條件外,其他環(huán)境相同。

4、保證12h定時光照和黑 暗環(huán)境,分別在缺氧暴露三周(大鼠)和四周(小鼠)后,將動物取出,對動物肺動脈高壓病理發(fā)展進行評價。


>>>>小鼠肺小動脈病理HE染色結(jié)果


與空白組比較,模型組小鼠的肺小動脈壁明顯增厚,管腔狹窄,組織間隙變小,血管周圍有明顯炎性細胞浸潤,有血管重塑表現(xiàn);WT%、WA%均***升高,差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。


>>>>小鼠免疫熒光法檢測肺組織 α-SMA 蛋白表達水平


與空白組比較,模型組小鼠肺組 織的 α-SMA 熒光強度明顯增強,肺小動脈平滑肌層增厚;完全肌化肺小血管比例***升高,差異有統(tǒng) 計學意義。


>>>>大鼠肺小動脈病理HE染色結(jié)果


隨低氧時間的延長大鼠肺小動脈壁逐漸增厚( 圖中黑色箭頭所示) ,尤其是中間平滑肌細胞增殖明顯。


>>>>大鼠右心室比重和平均肺動脈壓


隨著低氧處理時間的延長大鼠平均肺動脈壓( m***) 明顯增加,且右心室占全心的比重 RV/( LV+S) 也明顯增加。


03 肺栓塞模型


肺栓塞(pulmonary embolism,PE)是由內(nèi)源或外源性栓子阻塞肺動脈,引起肺循環(huán)和右心功能障礙的臨床綜合征 。

慢性血栓栓塞型肺動脈高壓( chronic thrombo embolic pulmonary hypertension,CTEPH)是PH 的一種獨特形式,是急性肺栓塞或肺動脈原位血栓形成的長期后果,表現(xiàn)為肺動脈增大、內(nèi)膜受損及周圍血管阻塞 。


操作方法:注射血栓或者異物。


血栓模型:是從自體或供體(異源)動物獲得血液樣本在體外凝結(jié)成血栓,然后再將其注入實驗動物中

注射血栓可較好表現(xiàn)急性肺栓塞的病理生理情況,但是由于離體血凝塊的大小和體積均不規(guī)則,難以保證肺血管阻塞的程度和持續(xù)性,而且自體PE模型還需要進行2次手術(shù),在大鼠、兔或豬中會產(chǎn)生循環(huán)休克,操作復雜。


注射異物:將惰性材料注入頸靜脈的方法來模擬肺栓塞,包括大鼠、兔、狗、羊、貓、豬都可以建立慢性血栓栓塞肺動脈高壓模型。


將體質(zhì)量(35-0-500g的大鼠,通過右頸靜脈注射聚苯乙、烯、微球(15-25 μm,130萬-195萬個珠/100g)。該方法可以控制進入肺部的微球數(shù)量,較準確地增加肺血管阻力,還避免發(fā)生免疫反應、大鼠纖維蛋白溶解率高等問題。


04 手術(shù)分流模型


外科分流術(shù)主要分為兩種: 大中動脈與肺動脈之間的分流,動靜脈之間的分流。


由于大、中動脈壓力大于肺動脈壓力,在大、中動脈與肺動脈之間建立分流可以使體循環(huán)的血液分流肺循環(huán),從而使得肺循環(huán)血液增多。該造模方法多選取豬、羊、犬等大型動物。



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