石蠟切片過(guò)程中如何確保切片不粘連?
在病理學(xué)研究和臨床診斷中,石蠟切片制作是極為關(guān)鍵的環(huán)節(jié),而切片粘連問(wèn)題卻時(shí)常困擾著技術(shù)人員,不僅影響切片質(zhì)量,還可能干擾后續(xù)的染色、觀察和分析。那么,在石蠟切片過(guò)程中,究竟該如何確保切片不粘連呢?
前期準(zhǔn)備:奠定堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)
組織處理:組織固定、脫水、透明等前期處理步驟必須嚴(yán)格規(guī)范。固定時(shí)間要充足,確保組織結(jié)構(gòu)穩(wěn)定;脫水過(guò)程要循序漸進(jìn),避免脫水過(guò)度或不足;透明時(shí)選擇合適的透明劑,并保證透明時(shí)間恰當(dāng)。若組織處理不當(dāng),如脫水不徹底,殘留水分會(huì)在后續(xù)的浸蠟和包埋過(guò)程中形成氣泡,導(dǎo)致切片粘連。
浸蠟與包埋:浸蠟時(shí)要控制好溫度和時(shí)間,溫度過(guò)高或時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)使石蠟變質(zhì),影響切片質(zhì)量;溫度過(guò)低則石蠟滲透不足,組織包埋不牢固。包埋時(shí),要將組織放置在包埋盒中間,周圍填滿石蠟,避免組織與包埋盒邊緣或其他組織接觸,減少粘連的可能性。
切片操作:精確把控細(xì)節(jié)
切片機(jī)調(diào)整:使用切片機(jī)前,要仔細(xì)檢查刀片是否鋒利、安裝是否牢固。刀片不鋒利會(huì)增加切片阻力,導(dǎo)致切片變形、粘連;刀片安裝松動(dòng)則會(huì)使切片厚度不均,甚至出現(xiàn)碎裂。同時(shí),要調(diào)整好切片的厚度和角度,一般切片厚度為4—6μm,角度要適中,以保證切片的完整性和連續(xù)性。
切片環(huán)境:切片室的溫度和濕度對(duì)切片質(zhì)量有很大影響。溫度過(guò)高會(huì)使石蠟變軟,切片容易粘連;溫度過(guò)低則石蠟變硬,切片困難。濕度過(guò)大也會(huì)導(dǎo)致切片粘連,因此要控制好切片室的溫濕度,一般溫度保持在20—25℃,濕度在40%—60%為宜。
后續(xù)處理:及時(shí)有效干預(yù)
展片與撈片:切片完成后,要及時(shí)將其放入溫水中展開(kāi)。水溫要適宜,一般在40—45℃,過(guò)高的水溫會(huì)使切片溶解,過(guò)低則切片展開(kāi)不充分。撈片時(shí),要選擇合適的載玻片,輕輕將切片撈起,避免用力過(guò)大導(dǎo)致切片破損或粘連。
烘片與保存:撈片后要將載玻片放在烤片機(jī)上烘片,烘片時(shí)間要足夠,使切片與載玻片緊密結(jié)合。烘片后要將載玻片妥善保存,避免灰塵、濕氣等影響切片質(zhì)量。
總之,在石蠟切片過(guò)程中,確保切片不粘連需要從前期準(zhǔn)備、切片操作到后續(xù)處理等各個(gè)環(huán)節(jié)嚴(yán)格把控,只有每個(gè)環(huán)節(jié)都做到位,才能制作出高質(zhì)量的石蠟切片,為病理診斷和科研提供可靠的依據(jù)。