翌科生物團(tuán)隊(duì)專注于外泌體研究,公司擁有成熟的外泌體研發(fā)經(jīng)驗(yàn)和技術(shù)服務(wù)平臺(tái),具備全套的外泌體提取、鑒定、分析試劑與服務(wù)。外泌體(exosome)是一群由細(xì)胞分泌的直徑在40-150 nm左右、密度范圍為1.09-1.18 g/ml的具有雙層磷脂膜結(jié)構(gòu)的囊泡樣物質(zhì),包含蛋白質(zhì)、mRNA、miRNA及其它信號(hào)分子(圖1)。目前的研究發(fā)現(xiàn),各個(gè)細(xì)胞類型(如腫瘤細(xì)胞、神經(jīng)元細(xì)胞、間充質(zhì)干細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、巨核細(xì)胞等)均有分泌外泌體的能力,并且外泌體也被發(fā)現(xiàn)存在于人體的各種體液(如血液、唾液、尿液、乳汁等)。體液中的外泌體及其內(nèi)含物被認(rèn)為可作為包括zhong瘤在內(nèi)的多種疾病的生物標(biāo)志物,廣泛應(yīng)用于疾病診斷,具有巨大的科研價(jià)值和臨床應(yīng)用前景。翌科生物做外泌體檢測(cè)服務(wù)怎么樣?誰(shuí)知道?中國(guó)哪家做外泌體提取試劑
外泌體富含膽固醇和鞘磷脂。2007年,Valadi等發(fā)現(xiàn)鼠的肥大細(xì)胞分泌的exosome可以被人的肥大細(xì)胞捕獲,并且其攜帶的mRNA成分可以進(jìn)入細(xì)胞漿中可以被翻譯成蛋白質(zhì),不僅只是mRNA,exosomes所轉(zhuǎn)移的microRNA同樣具有生物活性,在進(jìn)入靶細(xì)胞后可以靶向調(diào)節(jié)細(xì)胞中mRNA的水平。這一發(fā)現(xiàn)使得研究人員對(duì)exosome的研究熱情激增,截止已經(jīng)通過(guò)286項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)了41860種蛋白質(zhì)、2838種microRNA、3408種mRNA。英瀚斯生物專業(yè)做外泌體檢測(cè)、電鏡、粒徑分析。高效液相色譜外泌體分析做外泌體檢測(cè)的公司有哪些?
外泌體的提取主要包括以下幾種方式。一是超速離心法,這是外泌體提取比較常用的方法。此種方法得到的外泌體量多,但是純度不足,電鏡鑒定時(shí)發(fā)現(xiàn)外泌體聚集成塊,由于微泡和外泌體沒有非常統(tǒng)一的鑒定標(biāo)準(zhǔn),也有一些研究認(rèn)為此種方法得到的是微泡不是外泌體。二是過(guò)濾離心,這種操作簡(jiǎn)單、省時(shí),不影響外泌體的生物活性,但同樣存在純度不足的問題。三是密度梯度離心法,用此種方法分離到的外泌體純度高,但是前期準(zhǔn)備工作繁雜,耗時(shí),量少。四是免疫磁珠法,這種方法可以保證外泌體形態(tài)的完整,特異性高、操作簡(jiǎn)單、不需要昂貴的儀器設(shè)備,但是非中性pH和非生理性鹽濃度會(huì)影響外泌體生物活性,不便進(jìn)行下一步的實(shí)驗(yàn)。五是PS親和法,該方法將PS(磷脂酰絲氨酸)與磁珠結(jié)合,利用親和原理捕獲外泌體囊泡外的PS。該方法與免疫磁珠法相似,獲得的外泌體形態(tài)完整,純度比較高。由于不使用變性劑,不影響外泌體的生物活性,外泌體可用于細(xì)胞共培養(yǎng)和體內(nèi)注射。2016.9《ScientificReports》雜志發(fā)表了該方法比較新數(shù)據(jù),表明PS法可提取相當(dāng)高純度的外泌體
翌科生物公司外泌體提取試劑盒系列產(chǎn)品(針對(duì)血清、血漿)。樣品準(zhǔn)備1.新鮮的血清、血漿樣品,置于冰上待用;若為凍存的樣品,可于室溫解凍后置于冰上待用。2.將血清、血漿樣品渦旋混勻,根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求取適量體積轉(zhuǎn)移至離心管中,4℃,1000×g離心10min,棄沉淀,并將上清轉(zhuǎn)移至新的離心管中。外泌體分離1.轉(zhuǎn)移樣本至新管,加入與血清/血漿等體積的ExosomeIsolationReagent;2.渦旋混勻,此步后溶液將變混濁。3.放入4℃冰箱靜置過(guò)夜;4.4℃,3220g離心60min,棄上清,外泌體沉淀存留在離心管底部;5.用適量PBS重懸外泌體沉淀,存放于4℃(不超過(guò)1周)或-20℃/-80℃(長(zhǎng)時(shí)間保存)。注意事項(xiàng)1、使用前需將ExosomeIsolationKit充分混勻。2、操作過(guò)程需佩戴一次性手套操作,盡量在超凈臺(tái)內(nèi)或潔凈的環(huán)境進(jìn)行。外泌體研究的生物公司有哪些?
外泌體提取試劑盒 (細(xì)胞培液)本說(shuō)明書適用于翌科生物公司外泌體提取試劑盒系列產(chǎn)品(針對(duì)細(xì)胞培液)。
樣品準(zhǔn)備1.新鮮的細(xì)胞培液樣品,置于冰上待用;若為凍存的樣品,可于室溫解凍后置于冰上待用。2.將細(xì)胞培液樣品渦旋混勻,根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求取適量體積轉(zhuǎn)移至離心管中,4℃,1000×g離心10min,棄沉淀,并將上清轉(zhuǎn)移至新的離心管中。
外泌體分離1.轉(zhuǎn)移樣本至新管,加入與細(xì)胞培夜等體積的ExosomeIsolationReagent;2.渦旋混勻,此步后溶液將變混濁。3.放入4℃冰箱靜置過(guò)夜;4.4℃,3220g離心60min,棄上清,外泌體沉淀存留在離心管底部;5.用適量PBS重懸外泌體沉淀,存放于4℃(不超過(guò)1周)或-20℃/-80℃(長(zhǎng)時(shí)間保存)。
注意事項(xiàng)1、使用前需將ExosomeIsolationKit充分混勻。2、細(xì)胞培液樣品建議用0.22μm濾器過(guò)濾后再進(jìn)行外泌體提取操作。3、操作過(guò)程需佩戴一次性手套操作,盡量在超凈臺(tái)內(nèi)或潔凈的環(huán)境進(jìn)行。 南京外泌體檢測(cè)服務(wù)公司,科研課題解決方案!藥物外泌體檢測(cè)
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