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潤濕印跡。,對(duì)于大多數(shù)應(yīng)用和大多數(shù)抗體而言,0.5%的脫脂/低脂干奶溶液可以提供足夠的膜的阻塞。注意:請(qǐng)勿使用濃度高于0. 5%的干奶,因?yàn)樗赡軙?huì)導(dǎo)致吸墨紙架堵塞膜。如果使用其他封閉溶液,請(qǐng)參閱表5了解兼容性和推薦濃度?!裨谙礈?,封閉和抗體緩沖液中始終使用0.1%Tween8 20表面活性劑。這將減少溶液的表面張力,并確保孵育過程中抗體在印跡支架中的均勻分布。●由于SNAP i.d. @ 2.0系統(tǒng)中的免疫檢測(cè)時(shí)間很短,因此建議在開始操作之前應(yīng)準(zhǔn)備一抗和二抗稀釋液?!馦ultiBlot固定器所需的稀釋抗體的總體積為2.5 mL,Mini blot固定器為5 mL,10 mL用于Midi印跡固定器。,每次需要洗30次(MultiBlot為15毫升),以確保每次洗完后都能完全清洗印跡孵化步驟。上海益啟生物的樣本制備儀詢價(jià)公司電話。嘉定區(qū)MerckSNAPi.d.2.0加速器Merck儀器批發(fā)
體回收率差。 印跡大會(huì)和總議定書 1.用支撐層(藍(lán)色邊緣)握住吸墨紙托并弄濕膜層(白色)在潤濕過程中溢出水提供的托盤。不要弄濕支撐層。放置濕的滾動(dòng)板上的污點(diǎn)固定器。2.如果需要,將印跡預(yù)先在甲醇和水中浸濕,然后將其放置在印跡支架中心,蛋白質(zhì)面朝下。注意:印跡不得超過材料中指定的尺寸必填部分。3.輕輕滾動(dòng)印跡以去除氣泡,然后稀釋印跡保持并滾動(dòng)一次。4.打開吸墨紙固定框架,用力將吸墨紙固定在蛋白質(zhì)面朝上,然后將其放入框架中。一個(gè)缺口吸墨架可確保正確放置在框架中。注意:如果只在框架中運(yùn)行一個(gè)MultiBlot,請(qǐng)放置孔空白卡在第二口井中。5.關(guān)閉并鎖定框架。加入30 mL封閉溶液(MultiBlot為15毫升)。向下按框架并轉(zhuǎn)動(dòng)系統(tǒng)旋鈕施加真空。當(dāng)框架完全為空時(shí),關(guān)閉真空。注意:如果使用抗體回收托黃浦區(qū)MerckWB實(shí)驗(yàn)加速器Merck儀器一級(jí)代理益啟生物公司帶您了解樣本制備儀詳情。
2.0系統(tǒng)計(jì)算SNAP i.d.9 2.0系統(tǒng)所需的抗體濃度用于標(biāo)準(zhǔn)免疫檢測(cè)的濃度標(biāo)準(zhǔn)SNAP i.d.o 2.0免疫檢測(cè)免疫檢測(cè)多印跡迷你印跡Midi污點(diǎn)_Ab濃度1毫克/毫升1毫克/毫升1毫克/毫升1毫克/毫升所需抗體量_ 1微克0.25微克0.5微克1微克使用的抗體量30毫升2.5毫升5毫升10毫升比較終抗體稀釋1:30,0001:10,0001:10,0001:10,000使用的抗體庫存1微升0.25微升0.5微升1微升由于每種抗體都是只有一個(gè)的,并且檢測(cè)試劑的靈敏度各不相同,因此可能有必要進(jìn)行調(diào)整抗體或抗原濃度,使用的檢測(cè)試劑的類型或靈敏度或印跡X射線曝光時(shí)間。請(qǐng)注意,本指南只作為開發(fā)比較終抗體的起點(diǎn)濃度以獲得所需的性能。表2.封閉,抗體和洗滌的建議體積SNAP i.d.o 2.0SNA
PO緩沖液WBAVDP零零15零零毫升BLOT-QuickBlockerTM試劑WB57-175GM175克;Probumin@牛血清白蛋白8204731零零克5%堿溶性酪蛋白225毫升免疫組織化學(xué)(IHC)程序的組件SNAPi.d.@2.0免疫組織化學(xué)框架SNAP2FRIHC1個(gè)SNAPi.d.92.0IHC幻燈片固定器SNAP2SH2個(gè)配件過濾鉗,鈍端,不銹鋼XX62零零零零6P31L真空過濾瓶XX10047051個(gè)SNAPi.d.@2.0墨粉輥SNAP2RL1個(gè)高輸出泵,115伏,60赫茲WP621156零1個(gè)高輸出泵,100伏,50/60HzWP62100601個(gè)高輸出泵,220伏,50赫茲WP6222零5零1個(gè)真空管,內(nèi)徑6.4毫米x3m(內(nèi)徑4/4英寸x10英尺)MS采購正規(guī)細(xì)胞計(jì)數(shù)器哪家靠譜?
,0.45μm,8.5cmx10m卷IPVHB5R1個(gè)固定8-PPVDF,0.45μm,26.5cmx375cm卷IPVH00010Imobilon-FLPVDF,0.45微米,7厘米x8.4厘米片材IPFL0781010Imobllng-FLPVDF,0.45um,8.5cmx10m卷IPFL8SRImbilong-FLPVDF,0.45微米,26.5厘米x375厘米卷IPFL000101個(gè)Imbilong-PSQPVDF,0.2μm,7cmx8.4cm薄片ISEQ0785050Imobilon-PSQPVDF,0.2um,8.5cmx10m卷ISEQ85R1個(gè)。 產(chǎn)品描述:數(shù)量/包蛋白質(zhì)印跡試劑Immobilon@ForteWesternHRP基材WBLUF0500500毫升Immobi細(xì)胞跨膜電阻儀的直銷公司。黃浦區(qū)MerckWB實(shí)驗(yàn)加速器Merck儀器一級(jí)代理
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15分鐘。圖4.擴(kuò)展孵化(過夜):SNAP i.d.8 2.0系統(tǒng)與標(biāo)準(zhǔn)免疫檢測(cè)一種。 SNAP id.o 2.0蛋白檢測(cè)b。標(biāo)準(zhǔn)系統(tǒng)Midi印跡免疫檢測(cè)將A431細(xì)胞裂解液和大鼠肝裂解液(12至3 ug)轉(zhuǎn)移至Immobilon9-P膜。兩種印跡均用在TBST中制備的0.5%NFDM封閉。這SNAP i.d.c 2.0 Midi印跡被阻斷20秒,標(biāo)準(zhǔn)印跡為分鎖了1個(gè)小時(shí)。兩種印跡均與相同稀釋度的MAP激酶1/2(ErK1 / 2),但是,對(duì)于HRP偶聯(lián)的二抗山羊抗兔(AP132P),將SNAP i.d.2.0印跡孵育10分鐘在TBST中洗滌3次后,將標(biāo)準(zhǔn)印跡孵育1小時(shí)。 圖5.擴(kuò)展孵化(1小時(shí)):,SNAP i.d.o 2.0系統(tǒng)1小時(shí)協(xié)議與SNAP i.d.9 2.0系統(tǒng)標(biāo)準(zhǔn)協(xié)議與標(biāo)準(zhǔn)免嘉定區(qū)MerckSNAPi.d.2.0加速器Merck儀器批發(fā)