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來源: 發(fā)布時間:2025-07-05

取上述200μL細胞液加入小室,下室(培養(yǎng)板)加入900L含有10% FBS的培養(yǎng)基。不同規(guī)格的小室和培養(yǎng)板所加的體積不同,具體參考Millicell?產品說明書。37°C孵育24至72小時,依據(jù)**細胞類型而定。孵育結束,小心取出細胞小室,吸掉小室上層培養(yǎng)液,PBS清洗一遍,70%酒精或者4%多聚甲醛固定5min,0.5%結晶紫(2%乙醇或PBS溶解)染色20min,然后進行第8步或者第9步。PBS清洗兩次以去除多余的染料,立即用棉簽擦去濾膜上層的細胞,自然靜置風干。顯微鏡下觀察濾膜下層的細胞,隨機選取不同的視野計數(shù)并算平均值。結晶紫溶解濾膜下層細胞,然后用33%醋酸脫色,將結晶紫完全洗脫下來,洗脫液可在酶標儀上570nm讀取OD值。這種方法可以避免視野下細胞穿透不均勻帶來的誤差。細胞培養(yǎng) ,就選上海益啟生物科技有限公司,用戶的信賴之選,有需要可以聯(lián)系我司哦!楊浦區(qū)培養(yǎng)小室細胞培養(yǎng)哪家優(yōu)惠

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