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變態(tài)反應性腦脊髓炎（EAE）動物模型-艾菱菲生物可提供定制
導讀：
實驗性變態(tài)反應性腦脊髓炎（EAE）動物模型的癥狀、病理改變以及免疫學特征與人類的多發(fā)性硬化癥（multiple sclerosis,MS）、急性播散性腦脊髓炎相似，因此該模型被認為是這類疾病理想的動物模型。
實驗性變態(tài)反應性腦脊髓炎(experimental allergic encephalomyelitis,EAE)是由 T淋巴細胞介導的發(fā)生于易感動物的自身免疫病，主要特征為中樞神j系統(tǒng)(CNS)血管周圍單個核細胞浸潤和白質脫髓鞘。
選用動物
由于不同品種的動物、或同一品種不同品系的動物存在不同的遺傳背景，其表現(xiàn)為免疫系統(tǒng)的T細胞克隆株對自身抗原反應不同，因此實驗動物需要選擇對EAE模型敏感的動物。
從鳥類到哺乳類，多種動物均可誘發(fā)EAE，對EAE敏感的動物有Lewis大鼠、DA大鼠、PL小鼠、SLJ小鼠、豚鼠等。
鼠的EAE模型無論在臨床表現(xiàn)、病理、免疫、生化改變等方面都與人類臨床較為相似，因此在動物模型制備上我們常常選用大鼠（Wistar大鼠，200~220g）或小鼠（C57BL/6雌性小鼠，6-8周）。
構建方法
主要分為主動誘導法和被動誘導法。
1、主動誘導法
（1）制備抗原，并與佐劑混合制成抗原乳劑。
（2）大鼠于足下（腳墊）處注射抗原乳劑，小鼠于脊柱背側皮下注射抗原乳劑。48H后再注射百日咳毒su。
（3）注射當天為第0天，每日統(tǒng)計動物體重數(shù)據(jù)、動物疾病臨床神經(jīng)功能分級（Knono評分標準），直至免疫后30天。
（4）分離提取發(fā)病動物淋巴結細胞與MBP共培養(yǎng)，做抗原特異性T細胞增殖試驗。對T淋巴細胞分離和T細胞CD表型分析。
（5）動物腦脊髓組織病理和免疫組化分析發(fā)病后分離腦組織淋巴細胞FACS，可見到PKH2-GL標記細胞，而肝脾組織中極少發(fā)現(xiàn)PKH2-GL陽性細胞，表明具有器g特異性。
頸脊髓的組織學分析
組織學光鏡下可見鼠的腦和脊髓組織中有大量的炎性細胞浸潤，炎性細胞聚集在血管周圍呈現(xiàn)袖套樣改變。
模型特點：
給動物注射抗原9-11天開始發(fā)病，發(fā)病嚴重會導致動物死亡，未死亡的動物注射3周后開始逐漸恢復。
特別提示：抗原注射部位會影響到EAE模型的*終效果，如：潛伏期長短、發(fā)生率高低、死亡率和復發(fā)率。
2、被動轉移實驗：
構建方法：
分離EAE抗原特異反應性T細胞，轉輸給同品系健康動物（空白對照動物），使健康動物發(fā)病。
（1）取發(fā)病動物淋巴結進行細胞培養(yǎng)，并做CD4細胞篩選。
（2）測定細胞對抗原的特異性反應，PKH2-GL標記細胞。
（3）給健康動物注射細胞，10天后觀察癥狀，對動物腦組織和脊髓中單個核細胞分離，做細胞表型分析。
模型特點：
該實驗所建立的動物模型是研究EAE發(fā)病機制、治*預防的理想模型。具有高度可重復性，但沒有的原發(fā)性脫髓鞘。
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